不同种源印楝遗传多样性的ISSR分析.pdfVIP

34 第1期 林 业 科技 v01．34No．1 ：：!!!!篁!星：：：：=：：：=：至垒塞垦堇!塞兰篁篓!璧型篁塞垒!曼篁塾堕垒里垒鱼圣 = ：一：：』竺兰：=呈窒里皇= 文章编号：1001—9499(2009)01-0001一04 不同种源印楝遗传多样性的ISSR分析’ 范 刚1 尹鸿翔1 杜 娟1 张 艺h’ 唐 锐2 解培惠3 (1．成都中医药大学民族医药学院，四川成都611137；2．四川大学生命科学院，成都610064； 3．攀枝花市干热河谷应用生态研究中心，四川攀枝花617000) 摘要i利用]SSR分子标记技术对印楝进行遗传多样性分析，用9条引物进行扩增，共检测出81条清晰的位点， 其中79条具有多态性，多态位点百分率为97．53％，Nei’s基因多样性指数为0．3803，Shannon信息指数为 0．553 7。表明印楝遗传多样性很丰富。种源间遗传分化系数为0．4702，Shannon’8居群分化系数为0．4677，表 明印楝种源内的遗传分化大于种源间的分化。聚类分析将13个秤源分为2大类．来自缅甸的11个种源聚成一 类，来自澳大利亚和印度的种源聚成另外一类。结果表明，ISSR分子标记技术适合于印楝的遗传多样性分析。 关键词：印楝；种源；遗传多样性；ISSR 中图分类号：S792．33，S722．7文献标识码：A 印楝(Azadirachta 表1材料来源 indica)为楝科楝属植物， 常绿乔木，根系发达、耐旱耐瘠薄，不仅是很好 序号 种源号 来源地 序号 种源号 来源地 1 P11 缅甸 8 1014 缅甸 的荒山绿化、固沙护土和生态保护植物，而且其 2 P10 缅甸 9 1015 缅甸 果实、根、茎、叶、花都常应用于医药、农药、 3 P12 缅甸 lO GM 缅甸 4 P1 缅甸 1l ML 缅甸 化工原料、燃料等领域¨，2]。印楝于1998年首次 5 P2 缅甸 12 ADl．Y澳大利亚 引入四川省攀西地区，现已成功栽种印楝树30万 6 P3 缅甸 13 YD 印度 7 D6 缅甸 株，面积近667hm2，为当地的生态环境改善做出 了巨大的贡献。为促进印楝资源的保护和可持续 2 方 法 利用，本文以13个种源为研究对象，首次采用 IssR分子标记技术，从DNA水平上对印楝进行 2．1总DNA的提取 遗传多样性分析。 称取3～59经液氮冷冻后捣碎的叶片粉末， 采用改良CTAB法H’提取印楝基因组总DNA，用 1 试验材料 1．O％琼脂糖凝胶电泳检测DNA的大小和完整性， 一20℃保存备用。 样品采自四川省攀枝花市拉鲜村印楝种源试 2．2引物筛选 验林(1998年营建)基地，位于四川西南部与云 用D6进行预试验，ISSR引物根据加拿大哥