果胶酶分离纯化及分析方法的研究进展.pdfVIP

　第 35 卷 第 1 期 工 业 微 生 物 　Vol . 35 No . 1 　 　2005 年 3 月 Industrial Microbiology Mar . 2005 果胶酶分离纯化及分析方法的研究进展 贾 　月 , 　弓爱君 , 　邱丽娜 , 　王建森 (北京科技大学 ,北京 100083) 摘 　要 　　果胶酶能降解果胶质 ,在果汁制造 、果酒酿造等方面有着广泛应用 。果胶酶分子生物学 的迅速发展极大地促进了分离纯化与分析方法的研究 。由于不同菌种产生的果胶酶成分复杂程度 不同 ,分离纯化手段和分析方法也不相同。本文对果胶酶分离纯化手段及其分析方法进行了综述 。 关键词 : 果胶酶 ; 　分离纯化 ; 　分析方法 　　能分解果胶质的酶被称为果胶酶 。目前 , 国内 族中内切酶工业价值最大 ,所以,果胶酶的分离纯化 外在果胶酶方面的研究正在广泛深入地进行 。果胶 研究也主要集中在内切酶 ,基因工程研究也首先在 酶工业应用的商业利润促进了对其研究及开发 ,全 内切酶获得进展 。 世界有很多厂商生产果胶酶制剂 ,并且随着技术的 2 　果胶酶的分离纯化 进步 ,令生产成本下降 ,应用的范围也越来越广 。 　　果胶酶分离纯化的方法有很多种 ,可根据具体 1 　果胶酶的应用价值及研究前景 情况选择应用 。 　　果胶酶在食品工业主要应用于果汁制造[ 1 ,2 ] 和 2 . 1 　粗酶液的制备 [3 ,4 ] ( ) 果酒酿造 。在工艺过程中 ,添加果胶酶助剂能 　　粗酶液的制备通常来自: 1 无细胞的微生物培 够提高出汁率 ,加速果汁澄清 , 降低成本 。同时 , 由 养基上清液 ; (2) 含有果胶酶的植物组织浸出物 ; (3) ( ) 于果胶酶降解果胶质 ,产品更易于吸收和贮存 。果 微生物 该微生物能产果胶酶 感染植物后该植物组 胶酶还用于橘子脱囊衣和麻料脱胶[5 ] 、提高木材防 织浸出物 。 腐剂的作用[6 ] 、治疗 胃石[7 ] 及单细胞食品制备[ 8 ] 等 　　第一种方法来源于微生物的酶 ,如果是细胞外 领域 。 酶 ,粗酶液制备比较简单 ,即通过过滤或离心去除菌 　　果胶酶的生理生化作用也是研究植物生理机制 体即可 。如果是细胞内酶 ,则需要利用超声波法 、酶 的重要线索之一[9 ] 。植物的发育、分化及生长过程 解法 、碱 、去垢剂法以及研磨法等破碎细胞 ,使酶释 中 ,果胶质存在于初生细胞壁和细胞间质中 ,虽然其 放出来 。对于第二 、第三种方法从植物组织提取酶 , 含量不超过新鲜植物材料的 1 % ,但却在植物组织 需要对植物组织进行匀浆 。提取过程保持低温对酶 黏着并在保持其整体性上起重要作用 。当果胶质降 的稳定有益处 。此外盐浓度 、缓冲液成分以及 p H 解时 ,将导致细胞分离[ 10 ] 。因此 ,果胶酶作用于果 都对提取的收率有影响 。Konno 等人用磷酸钠溶液 胶使其降解是与植物生长过程相关的重要现象 。研 成功提取了来自西红柿的内切果胶酸盐裂解酶[ 12 ] , 究这一现象