利用克雷伯肺炎杆菌限制性底物发酵生产1,3-丙二醇.pdf

中国生物工程杂志ChinaBiotechnology，2008，28(10)：49—54 利用克雷伯肺炎杆菌限制性底物发酵 生产1，3一丙二醇术 苗茂栋1 吴敏1宰4邵千飞2马全红1 蒋知欲1 (1东南大学化学化工学院南京2111892安徽立兴化工有限公司绩溪245300) 摘要研究了克雷伯肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)批式流加发酵生产1，3一丙二醇的发酵工 艺，根据1，3一丙二醇(1，3-PD)的生产和茵体生长相关的特点，采用营养基质限制性流加的发酵 工艺，通过控制氮源氯化铵以保持细胞稳定生长。结果表明：过低的氮源浓度，细胞生长受到限 制，影响产物1，3-PD的合成；过高的氮源浓度，细胞比生长速率增加，但1，3-PD关于消耗甘油的 得率降低，用于生长和维持代谢所消耗的甘油量增加。以0．41g／(L·h)的氮源流加速率，残余 h一28 氯化铵浓度在O．1g／L时，转化率和生产强度最高。发酵25 h后，1，3一丙二醇最终浓度达 到52．03 g／L，生产强度为2．04g／(L·h)，相对于甘油的摩尔转化率为0．66，分别比氮源限制前提 高了28．0％、35．1％及29．4％。通过限制性流加氯化铵，控制细胞的比生长速率，使底物甘油有效 转变为发酵的目标产物1，3-PD，有效实现产物1，3-PD的高生产强度以及对甘油的高转化率。 关键词1，3一丙二醇氮源限制流加比生长速率生产强度摩尔转化率 中图分类号TQ923 为替代日趋紧缺的石油、煤、天然气等化石资源， 文献研究了甘油发酵的转化率情况，在以甘油为 推进以生物质工程技术为核心的绿色生态材料的发 底物的发酵中，如乙酸能够作为甘油代谢的唯一副产 mol／ 展，生物基多元醇1，3一丙二醇(1，3-Propanediol，简称物，则1，3一丙二醇的产率会达到最高值0．67 1，3-PD)的技术开发已列入2008年国家发改委生物基 moi，若将丙酮酸裂解所产生的乙酰一CoA导入三羧酸循 材料高技术产业化专项规划。1，3一丙二醇与对苯二 甲酸聚合而成的聚酯纤维(m)，是目前合成纤维新品 达到0．88b冉o。陶春平等。刊发现氮源浓度对菌体生长、 种开发的热点。1’21；它还作为医药和有机合成的中间体 产物和副产物的代谢有着重要影响，维持发酵培养基 应用于化妆品、制药及生物材料中旧J。克雷伯氏杆菌 起始5．35g／L(NH。)：SO。浓度不变，控制流加氨水稀 是微生物发酵甘油生产1，3一丙二醇的菌种之一，在 释率可以提高1，3一PD的最终浓度和甘油到l，3-PD的 厌氧及好氧条件下均可代谢甘油生产1，3一丙二醇。 转化率；修志龙旧1从简化培养基、降低成本角度，提出 一般认为氧气存在会抑制代谢，厌氧发酵有利于1，3 就细胞生长而言，50mol／m3NH。+(以NH。CI计为2．67 一丙二醇产出，但厌氧发酵周期长，生产强度低，因此 g／L)就足够，通过氨水流加实验表明发酵采用无铵培 提高发酵的生产强度和转化率是工业化生产的关键。 养基和氨水并用的pH调控策略是可行的；杜晨宇等归】 研究表明在微量供氧发酵条件下，克雷伯氏杆菌发酵 认为提高菌体浓度和菌体比生长速率，将会提高生产 生产1，3一