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基于原子力显微镜的细胞弹性测量及分析方法.pdf
第31卷第4期 电 子 显微 学报 V01.3r.No.4
2012年8月 JournalofChineseE1ectron 2012.08
MicroscopySociety
文章编号:1000一6281(2012)04一0339—07
基于原子力显微镜的细胞弹性测量及分析方法
. 鲁卓阳1,龙建纲1,李涤尘2,刘健康h
(西安交通大学1.生命科学与技术学院,2.机械制造系统工程国家重点实验室,西安陕西710049)
摘要:原子力显微镜作为纳米压痕工具已被广泛应用于测量细胞等生物材料的力学性能。然而,由于研究目的
实验方法和数据处理方法的不同,造成实验结果差异大,数据提取方式不准确,结果分析解释不清等问题。本文以
细胞为例,对实验数据获取和处理方法的适用范围、优缺点、可靠性及结果的分析方法进行讨论,并与其他力学性
能测量方法相比较,以期提高实验结果的可靠性,为细胞力学性能实验的开展提供参考。
关键词:原子力显微镜;细胞;力学性能;数学模型
中图分类号:Q66;TGll5.21+5.9文献标识码:A
近年来,原子力显微镜被广泛应用到生命科学 行比较分析,系统地提出了完备的细胞力学曲线实
研究中。其具有的生理环境高分辨率成像以及力学 验数据分析方法和策略。
性能测量功能使其成为细胞生物学,分子生物学,力
1 探针类型
学生物学,纳米医学等领域的重要研究工具¨’2]。
细胞的力学性能包括细胞刚度,粘弹性,硬度以及粘 评估细胞力学性能需选择适合的探针类型。原
附性等,正逐渐成为力学生物学中的一项重要内容, 子力显微镜探针由具有柔性的悬臂和垂直于悬臂的
与细胞的结构、功能、疾病的发生、发展有着十分紧 针尖构成,材料主要为硅或氮化硅。针尖与样品表
密的联系¨1。原子力显微镜具有定量检测探针与 面相接触,针尖形状和大小影响压痕过程中针尖的
样品问力相互作用的功能,测量精度达到皮牛级,可 受力(即悬臂的弯曲),进而影响力曲线的形状和最
用于检测极软或在纳米尺度上具有非均匀性的材料 终测得的力学性能。针对不同类型的针尖。对应不
力学性能H“1。 同的力学模型。即使同样类型的探针,在做力学曲
然而,尽管原子力显微镜具有上述力学性能测 线时的具体参数不同(例如压痕深度),也影‘响相应
量的功能,数据处理存在的问题使得已取得的实验 模型的适用范围。目前可见到的针尖类型包括球
结果呈现较差的一致性。在众多已发表的文献中, 形,圆锥形,四棱锥形,折角形,长圆柱体(碳纳米管
对力曲线的处理都仅停留在简单计算曲线斜率或简 修饰探针)等。
单套用力学模型进行拟合的阶段,都无法对结果的 为获得更大面积的压痕,以更好地评估细胞表
可靠性或误差进行有效的描述。由于实验条件,参 面的平均细胞力学性能,微尺寸球形探针被应用于
数选择,探针类型,以及样品本身性质等的不同,所 细胞力学性能检测¨1’”1。该方法对探针针尖进行
获得数据的处理方式也不相同。如何正确分析和处 修饰,将直径在数微米的聚苯乙烯、玻璃等材料制成
理实验数据,就成为影响实验结果和结论的关键因 的微球粘附在悬臂底部,以代替原有针尖¨3’14]。球
素。许多学者对数据分析技术进行不断地改进或将 形压痕对细胞表面造成更小的局部应变,可以降低
力学模型应用得到的结果进行实验验证。叫。另 细胞的非线性或破坏性形变1。然而,细胞表面的
外,以往文献报道采用原子力显微镜做压痕实验获 弹性等性能并非均匀分布。细胞骨架,细胞核,细胞
得的细胞刚度
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