外源性LTB4对CIA小鼠TregTh17脾细胞分化的作用.pdf

·1230· Bulletin2009 Phar,rmcological 中国药理学通报Chinese Sep；25(9)：1230—4 秦瑾1，陈海英1’2，丛斌1，魏平2，张敬各1，李巧霞1，马春玲1，李淑瑾1，付丽红1，于峰1 (1．河北医科大学基础医学院，河北省法医学实验室，河北石家庄050017； 2．河北医科大学第三医院免疫风湿科，河北石家庄050051) 977．6 中国图书分类号：R-332；R392．12；R684．302．2；R 经5，脂氧合酶(5-LO)代谢产生的炎症介质，具有很 文献标识码：A文章编号：1001—1978(2009)09—1230—05 强的趋化作用和炎症调节作用。已有报道LTB4具 摘要：目的探讨外源性白三烯B4(LTB4)对胶原诱导型关 节炎(collagen-inducedarthritis，CIA)小鼠脾细胞调节性T细 胞(Treg)和11h17细胞分化的调节，进一步阐明LTB4在类 道。本文通过成功建立CIA小鼠模型，d28分离小 风湿关节炎(RA)发病中的作用机制。方法建立CIA小鼠 鼠脾细胞，体外培养加入CII与不同浓度的LTB4共 模型，取造模d28的脾细胞，体外实验分析外源性LTB4对 Treg和n17细胞分化的影响。应用流式细胞术检测CD4+ 胞分化的影响。 CD25+Foxp3+细胞的数量，荧光定量PCR技术检测调控 1材料与方法 Treg和，nll7细胞分化的特异性转录因子Foxp3和RORTt的 1．1材料 mRNA的表达，酶联免疫吸附(ELISA)方法检测培养细胞上 1．1．1 wk 28 实验动物 健康6DBA／1小鼠，6～8 清ILl7的含量。结果成功建立CIA小鼠模型；造模d 分离小鼠脾细胞，体外培养加入鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)共同孵 龄，由上海斯莱克实验动物中心提供，实验动物证书 育，随着LTB4浓度增加(0．01、0．1、1 I．Lmol·L“)，CD4+ 号：SCXK(沪)2007顸)05。 mRNA的表达相应 CD25+Foxp3+细胞数量相应减少，Foxp3 降低；相反，IL一17的含量相应增加，RORMmRNA的表达相 应升高。结论LTB4抑制CIA模型脾细胞Treg细胞的分 anti—mouse／rat Foxp3StainingSet及其所需相应的同 化，促进Thl7细胞的分化，提示LTB4在CIA发病过程中具 有一定的促炎活性。 RT SYBR regentKit购自大连宝生物公司，Power GreenPCRMaster Mix购自AppliedBiosystems公司， 关键词：白三烯B4；调节性T细胞