抗猪IgG单克隆抗体的制备与应用.pdfVIP

第30卷第9期 中国预防兽医学报 V01．30．No．9 2008年9月 Preventive ChineseJournalof Medicine Sep．2008 Veterinary 抗猪IgG单克隆抗体的制备与应用 蒋媛媛，郭军庆，颜 焰，周继勇’ (浙江大学动物预防医学研究所，浙江杭州310029) 胞融合技术获得8株稳定分泌抗猪IgO单克隆抗体的杂交瘤细胞。Ig亚类分析表明，所制备单克隆抗体的轻链亚 类均为K，重链除6H3为lgG2b外，其余7株均属于IgGl。Westernblot分析显示，5株单克隆抗体识别猪IgG 轻链。3株单克隆抗体识别猪lgG重链。以蛋白G亲和层析纯化单克隆抗体7H1腹水。用改良过碘酸钠法进行辣 800。将 根过氧化物酶(HRP)标记，结果显示，m冲标记抗猪IgG单克隆抗体对纯化猪IgG的工作浓度达l：12 率为95．12％，其ELISA和Westernblot的工作浓度为1：2000和l：10 有高度的敏感性。本研究制备的酶标抗猪IgO单克隆抗体为猪病的免疫诊断试剂研究和猪细胞生物学研究提供了 一种基础工具。 关键词：猪；lgG；单克隆抗体；辣根过氧化物酶标记 中图分类号：$852．53 文献标识码：A ofthemonoclonal Preparation antibody swine againstIgG JIANG Yuan-yuan，GUO Yan，ZHOU Jun—qing，YAN Ji—yong‘ ofPreventive (Institute VeterinaryMedicine，ZhejiangUniversity，Hangzhou310029，China) was from andusedtoimmnizeBALB／c Abstract：Theprotein seTnln IgG purifiedpig mice．Eighthybddomassecreting monoclonal toswinewereobtainedstandardcellfusion showed antibodies(mAbs)specificIgG by techniques．Subtypinganalysis thatthe chainofmAbs to formAb the chains to．Fiveofthe heavy belongedlgGlexcept 6H3(IgG2b)，andlight belonged eight the withthe mAbs the chainofswineinWestern-blot otherthreemAbsreacted chain． recognizedlight IgO analysis?while heavy ThemAbwaslabelledwithhorserad