抗猪传染性胃肠炎M蛋白单克隆抗体的制备及部分特性鉴定.pdfVIP

第29卷第11期 中国预防兽医学报 V01．29．No11 Chinese of Nov．2007 2007年11月 JournMPreventive Medicine Veterinary 抗猪传染性胃肠炎M蛋白单克隆抗体的 制备及部分特性鉴定 乔薪瑗，李桂伟，张冠群，李海滨，李一经’ (东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨150030) 摘要：以纯化的猪传染性胃肠炎病毒重组M蛋白免疫BALB／c小鼠。按常规方法进行融夸、筛选．最终获 xl 检测lB3、3C2、4A5细胞培齐上清的效价分别为1／4000、1／1000、1／4000。腹水效价分别为204、2×10S、 2x105。通过间接ELISA做痛原捡测。这3株单抗不与猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病痛毒和猪轮状病毒发生变 更反应，而与传染性胃肠炎病毒显示良好的特异性。用制备的单抗通过间接免痘荧光做搞原捡剐，发现染色后 TGEV感染的细胞培养物在胞浆和细胞膜上出现黄绿色荧光，未接种病毒的细胞培养物未见有黄绿色闪亮荧光， 结果表明，所制备的抗重组TGEVM蛋白的单抗对病原检测具有很高的特异性，为TGEV准确快速的搞原诊断 和TGEV感染相关的基础性研究提供了物质基础。 关键词：猪传染性胃肠炎病毒；单克隆抗体；间接ELISA；间接免疫荧光 中图分类号：S852．43 文献标识码：A ProductionandidentificationofmonoclonaIantibodies recombinantTGEVM against protein Q]AOXin—yuan，LIGui—wei，ZHANGGuan-qun，LIHal-bin，LI Yi-jing ofAnimal (College Medieme．NortheastAgriculturalUniversity，Harbin 150030，China) micewereimmunized rMeandcell and Abstract：BALB／c inoseulationselectionwerecarriedout standard wi也purified by method．Threeseries TGEVMP as obtained．TheseMcAbwere against designatedIB3，3C2，4A5respectively，were hybridoma to indirectELISAbutdidntreactwith PrV．The IFN TGEV PEDV，PRVand McAbWeleusedfor todetect hi曲lyspecific by TGEV．IBRScellsinfectedwithTGEVshowed and yellowgreen