抗胚胎小鼠心肌α1D钙离子通道抗体的制备及鉴定.pdfVIP

癣泪山乐州瞄第24卷第23期20修年12月JApplClin脚，；Ioi．24No．23，DBc．2009 ·论著· 抗胚胎小鼠心肌od D钙离子通道抗体的制备及鉴定 翟溯澜L2，张沙沙1，赵钟钟1，钱辉1，张朝1 (1．南京师范大学生命科学院，江苏省分子医学生物技术重点实验室，南京210046；2．南京医科大学药理学系，南京 210029) 摘要：目的制备针对胚胎小鼠心肌L型钙通道Carl．3编码的alD驱基胞内末端的多克隆抗体。方法通过基因重组从小鼠 G 新西兰家兔，收集的免疫血清经protein GST—alDC／alDN。制备2种IsG型多克隆抗体，经ELISA检验证实二者效价均较高，滴度往1：256000时仍有信号，其中GsT．alDN 的效价更高。用Westernblot法检测发现，2种抗体都均在相对分子质量240 000处得到单一的蛋Fj印迹条带．特异性良好，能识别 白在小鼠胚胎心脏发育过程中分布的时空特征及研究胚胎发育过程中的钙离子相关信号调控活动奠定』，基础。 实局儿科锰床杂志t2009。24123)：lS4s一1847 关键词：胚胎心脏；多克隆抗体；小鼠 中图分类号：R725．4 文献标志码：A 文章编号：1003—515X(2009)23—1845—03 and Identificationof ofMouse CardiacCald啪ChanneldD Preparation PolyclonalAntibody Embryonic ZHM Zhao。 Su—lan“‘。ZHA3JGSha—sha‘。ZHAOZhong—zhong’．Q／ANHa／1．2Z“M Key forMoleeularandMedical ofLife Normal (1．JiangsuLaboratory Biotex：lmology，CollegeScience。NaijingUniversity，Nanjing21{3046。Jiangsu of Medical Provin_【’e．China；2．DepartmemPharmacology，NanjingUniversity。Nanjing210029，JiangsuProvince．China) To and ofaiDsuburfitof calciumchannelencodedCavi．3 Abstract：Objectivepreparehi曲literspecificpolyclonalantibody L—type by born heart．Methods DN／ctlDCw鹅obtainedrecombinationfromrmceeil． m㈣embryonic Prokaryotic expre．《sionplasmidspGEX一4T—al by heart．Therecombinantof wastrausformed and broynie pGEx一4T—cdDN／alDcinto￡僦BL一21，induced expressedbylsopropyl—B—D—