抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽在毕赤酵母中的表达及活性鉴定.pdfVIP

生物技术通报 201 ·研究报告· BIOTEcHNoLoGYBULLETIN 1年第6期 抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽在毕赤酵母中的 表达及活性鉴定 李忠清1’23王亮13 (1中国科学院新疆分院理化技术研究所，乌鲁木齐830011；2新疆金牛生物有限公司，乌鲁木齐830026； 3中国科学院研究生院，北京100039) 摘要：利用巴斯德毕赤酵母系统表达抗茵肽牛乳铁蛋白肽衍生肽简称LfeinBD，获得的表达产物具有较强的抗茵活 性。将人工设计的用化学合成法合成的以酵母偏爱密码子编码的LfeinBD基因片段克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达栽体 I酶切线性化，电击法转化毕赤酵母GSll5宿主茵，G418 pPIC9K中，获得的重组质粒pPIC9K．minBD通过限制性内切酶Sac 诱导表达5d，每24h取上清1mL，进行抑茵试验。结果表明，抗茵肽牛乳铁多肽衍生肽基因已整合到酵母细胞基因组中并获 得表达，经0．5％甲醇在30℃诱导48h可产生较强抗茵活性的抗菌肽，而且对氨苄青霉素抗性的大肠杆茵亦有较强的抑茵 作用。 关键词： 牛乳铁蛋白肽衍生肽(LfcinBD)毕赤酵母表达系统抗茵活性 andCharacterizationofBovine Expression Lactoferricin-derivedinPichia Peptide pastoris LiZhongqin91·2·3WangLian91·3 TechnicalInstitute and 83001 (1Xinjiang Chemistry，ChineseAcademyofSciences。Urumqi1； ofPhysics 2 Jinniu 830026；3Graduatehool，Chinese XinjiangBiologyCo．Ltd，Urumqi AcademyofSciences，Beiiing100039) Bovinelactoferricin-derived inPwhm Abstract： secretlyexpressed yeastexpressionsystem，with peptide(LfcinBD)was pastoris of bacteria．LfcinBD andchemical wasclonedinto vector hishactivitykilling genefragment埘tlldesigned synthesis expressionpPIC9K． obtained andthen recombinant a．s linearizedandtransformedintoPiehia strains plasmid，designatedpPIC9K·LfcinBD，was pastoris GSl15 transformantsw