抗猪瘟病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定.pdfVIP

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2015-09-09 发布于湖北
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抗猪瘟病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定.pdf

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抗猪瘟病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定.pdf

华北农学报·2009，24(3)：64-68 抗猪瘟病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定许保疆1,2，陈陆1，游一h2，刘春生1，郑鹿平1，王川庆1 (1．河南农业大学牧医工程学院，河南郑州450002；2．河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南郑州450002) 摘要：为对猪瘟病毒(CSFV)建立更加有效的临床检测方法。用纯化的猪瘟兔化弱毒免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与Sp2／O骨髓瘤细胞融合。经ELISA方法筛选和3次亚克隆，最终获得了5株能稳定传代并分泌抗猪瘟病毒单克 600—1：3 200一l：102 (c7，C9，G10)亚类。经鉴定，5株单抗细胞培养上清效价为l：1200，腹水效价为1：51 400。交叉试验及特异性抗原阻断试验表明，所制备的McAb与其他抗原无交叉反应性，均完全针对猪瘟病毒(CSFV)抗原决定簇，具有高度特异性。稳定性试验表明，制备的杂交瘤细胞株经连续传代25代和经3次冻存复苏后，仍能稳定分泌特 McAb的成功制备，为进一步研究CSFV的生物学特性及其快速诊断方法的建立奠定了基础。异性抗体。抗CSFV 关键词：猪瘟病毒；杂交瘤；单克隆抗体；ELISA；鉴定中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：1000—7091(2009)03—0064—05 ofMonoclonalAntibodiesClassicalSwineFever Preparation against of Characters VirusandTheirIdentification Biological XU Lul，YOUYil，一， Bao—jiangl2，CHEN LIU Chun-shen91，ZHENGLu-pin91，WANGChuan·qin91 ofAnimalScienceand Medicine，Henan (1．College Veterinary Agricultural 2．Instituteof and of Veterinary，HenanAgriculture 450002，Chin) Farming Academy Sciences，Zhen曲ou swine was andusedtovaccinatetheBALB／emice．After Abstract：Theclassicalfever、ri瑚(CSFv)isolate purified imnemizedfor5times．the啪Ilsecellswe陀usedtofusewiththe cellline screenedEUSA spleen myeloma Sp2／O．After by be— andsubclonedfor3 strainsof and4E8were whichG9and4E8 times，five hybridomasC7，C9，G9，G10 obtained，of