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用改进的酚_氯仿法提取鱼类基因组DNA效果的分析,酚氯仿抽提dna,酚氯仿抽提dna步骤,酚氯仿抽提dna原理,酚氯仿法提取dna步骤,酚氯仿法提取dna,酚氯仿提取dna步骤,酚氯仿提取dna,酚氯仿提取细胞dna,苯酚氯仿抽提dna
27 2 V o l. 27 No. 2
2006 3 A ct a Ecolog iae A nimalis Dom ast ici M ar 2006 *
-
DNA
马洪雨, 郭金峰, 岳永生*
( , 2710 18)
] 提取鱼类基因组D NA 的研究报道并不多见, 效果也各有差 本文以泰山螭霖
鱼东平湖鲤鱼东平湖鲫鱼为材料, 采用改进的酚- 氯仿法提取基因组D NA , 并进行了紫外
分光光度琼脂糖凝胶电泳微卫星P CR 扩增等方法的鉴定结果表明, 本方法提取的基因组
DNA 浓度在0 . 9Lg / LL ~ 3. 25Lg/ LL 之间, A 260/ A 280 比值在 1. 79~ 1. 87 之间, 电泳条带整
齐明亮, 适合微卫星P CR 扩增, 且整 个操作过程使用试剂较少, 简单易行
] 鱼类; 基因组DN A ; 酚- 氯仿法
] S8 11. 5 ] A ] 1004- 522 8( 2006) 02- 00 85- 03
DNA , , :
( PCRSo ut her n P : 5GT CCA GA CT GT CA T CA G GA G 3 , R: 5G
) , A G GT GT A CA CT GA GT CA CG C 3
1]
DNA ( 2004) 1. 1. 3 主要仪器
- D NA , DK ) S 12 ,
2]
S . Roques ; 5415D , Eppendorf
- ; DY Y ) 8 DY Y ) 5 ,
DNA , ; M ast eroycler Gradient PCR ,
- , DNA , Eppendor f ; , Ep-
, pendo rf
DNA 1. 2
1. 2. 1 基因组DNA 的提取
1 3]
- : P aaboS ( 1988)
1. 1 - : (
1. 1. 1 材料来源 ) 0. 1 g, 300LL ( T ris- Cl 10
( 35 ) mM , EDT A 0. 1M , SDS0. 5% , pH = 8. 0) 1. 5 mL
; ( 19 ) ( 37 ) , , 300 LL
5 LL K ( 20 m g/ mL) , ,
1. 1. 2 主要试剂及微卫星引物 55 e 300 LL T ris-
K T ris- 300LL , 10 min, 13000 rpm
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