基于海马神经干细胞的增殖和分化机制探讨肝肾-藏泄互用-关系的内涵.pdfVIP

基于海马神经干细胞的增殖与分化机制探讨肝肾 “藏泄互用”关系的内涵 陈攀1,2徐志伟1敖海清1吉云鹏1周江霞1 1广州中医药大学，广州510405 2广西中医药大学，南宁530001 摘要：目的：观察四逆散和六味地黄丸含药血清对体外培养海马神经干细胞(NSCs)的经典Wnt信号通路 及非经典Wnt信号通路的影响，从NSCs的增殖与分化机制探讨肝肾“藏泄互用”关系的内涵。方法：分离新生 24h内SD大鼠海马NSCs进行体外传代培养，采用巢蛋白免疫荧光染色鉴定NSCs。将第3代NSCs分别采用10％的 正常血清、六味地黄丸低、高剂量(2.08、 2.66g/mL)含药血清、四逆散低、高剂量(1.33、2.66g/mL)含药血 清培养7d。观察各组细胞的增殖能力，检测Wnt1、β-catenin、Wnt5a、JNK蛋白的相对表达量。结果：①六味 地黄丸高、低剂量含药血清组的细胞增殖能力最强，与其他各组比较均有统计学意义(P＜ 0.05，P＜0.01)。 ②Wnt1、β-catenin表达量在六味地黄丸高、低剂量及四逆散高、低剂量含药血清组均明显高于正常血清对照组 (P＜0.01),其中Wnt1的表达量在六味地黄丸高、低剂量含药血清组的表达量最高。Wnt5a、JNK的表达量在六 味地黄丸高、低剂量含药血清组均低子其他各组(P＜0001)，其中Wnt5a在四逆散高、低剂量含药血清组表达均 高于其他各组(P＜0.01)；JNK在四逆散低剂量含药血清组表达量最高，与其他各组比较均有统计学意义(P＜ o.o1)。结论：在NSCs层面上，肾主藏精主要表现为促进NSCs的增殖和分化；肝主疏泄主要表现为促进NSCs的迁 移与分化；而肝肾“藏泄互用”的关系实质内涵可体现为对NSCs的增殖、迁移及分化的协调平衡调控作用。 关键词：海马；藏泄互用；神经干细胞；信号通路 Probeintoconnotationofinterdependencebetweenstoringanddischargingofliverand kidneybasedonproliferationanddifferentiationofhippocampalNSCs CHENPan1，2XUZhi-wei1AOHai-qing1JIYun-peng1ZHOUJiang-xia1 1GuangzhouUniversityofChineseMedicine,Guangzhou510405,China 2GuangxiUniversityofChineseMedicine,Nanning 530001,China Abstract:Objective:ToobservetheeffectsoftheserumcontainingSiniPowderandLiuweiRehumanniaPillonthe classicWntsignalpathwayandthenon-classicWntsignalpathwayofthehippocampalneuralstemcells(NSCs)invitro.The connotationofinterdependencebetweenstoringanddischargingofliverandkidneywasinterpretedwiththeproliferationand thedifferentiationofthehippocampalNSCs.Methods:TheNSCsisolatedfromthehippocampusoftheneonatalSDratswithin 24hofbirthwereculturedinvitroandidentifiedbythenestinimmunohistochemicalfluorescencestaining.FortheNSCsof3rd generation,itwasculturedrespectivelywith10％ normalserum,thelow-andhigh-dosesofserumcontainingSiniPowderthelow- andhigh-doseofserumcontainingLiuweiRehumanniaPill.After7days,theproli