使用poly（a）-tailed rt-pcr对猪部分micrornas在胚胎期de表达进行验证.pdfVIP

中国患亏c墨搪 2011,27(17)：6—12 ChineseAgriculturalScienceBulletin 使用poly(A)一tailedRT—PCR对猪部分microRNAs 在胚胎期的表达进行验证 周 焱 ，宋 齐 ，王 欢 一，王海军 ，朱建 国 ，逄大新 ，欧阳红生 ，唐小春 f吉林大学畜牧兽医学院吉林省动物胚胎工程重点实验室，长春 130062： 吉林农业科技学院生物工程分院，吉林 132101) 摘 要 ：MicroRNAs(miRNAs)是一系列小的非编码的RNA，长度大约为21～22nt。主要通过抑制翻译或 者进行mRNA的降解而在多种生理以及发育过程中发挥很重要的作用。miRBasel6．0(2010)数据库中 显示，注释的线虫、小鼠、大鼠以及人的miRNAs分别有 175种、673种、408种和 1048种。而哺乳动物猪 的miRNAs仅仅为2l1种，特别是在胚胎生长发育过程 中调节基因表达的miRNAs的研究十分欠缺 。因 此使用polyA()．tailedRT-PCR对猪的10种miRNAs的表达在猪胚胎期第33天(E33)进行验证。对于鉴 定的这 1O种miRNAs，通过实时定量PCR对其表达水平进行相对分析，并使用PicTar和TargetScan软件 对其靶基因进行预测。结果表明：在头部组织中ssc．miR-9的表达量最高的，而在 内脏组织中88C．miR_l 的表达量最高。功能分析表明这些miRNAs可以参与神经、大脑、肌肉、器官的发育。此研究为以后进 一 步的研究猪以及相关动物胚胎发育的miRNAs的功能提供有用的信息。 关键词：microRNA；猪 ；胚胎发育；poly(A)．tailedPCR；靶标预测 中图分类号：$828 文献标志码 ：A 论文编号：2011—0272 IdentificationPigParti~microRNAsatEmbryobyPoly(A)-tailedRT-PCR ZhouYan，SongQi，WangHuan ，WangHaijun，ZhuJianguo，PangDaxin， OuyangHongsheng，TangXiaochun (CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedwine，JilinUniversity，Changchun130062； 2DepartmentofBiologyEngineering,JilinAgricultureScienceandTechnologyCollege，Jilin132101) Abstract：MicroRNAs(miRNAs)areaclassofsmallnoncodingRNAsof21~22nucleotidesinlengththatplay importantrolesinmultiplebiologicalanddevelopmentalprocessesbydegradingtargetedmRNAsorrepressing mRNAtranslation．ThedatabaseofmiRBasel6．0(2010)showthatthereare175，673，408，and1048annotated miRNAsforCaenorhabditiselegans，Musmuseulus，RattusIIOIvegicHs，and Homo sapiens，respectively． However，thereareonly211miRNAsdescribedofrSosscro~a．Inparticulra，themiRNAswhichregulategene expression in embryonicgrowthanddevelopmentwerestillpoorlyunderstood．Therefore，in thisstudyw