原发性肝细胞癌中乙型肝炎病毒基因整合de突变分析.pdfVIP

2011钷 6月 首 都 医 科 大 学 学 报 Jun．2011 第 32卷 第 3期 JournalofCapitalMedicalUniversity V01．32 No．3 [doi：10．3969／j．issn．1006-7795．2011．03．001] ·传 染 病 及 相 关 慢 性 疾 病 研 究 进 展 · 原发性肝细胞癌中乙型肝炎病毒基因整合的突变分析 张 婷 许 强 杨紫伟 蒋素贞 鲁凤 民 陈香梅 庄 辉 (1．北京大学医学部病原生物学系，北京 100191；2．南方医科大学附属南方医院感染内科 ，广州 510515) 【摘要】 目的 探讨乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)整合序列中基本核心区突变与乙肝病毒相关肝癌发生的相关性。方 法 应用Alu—PCR和基于接头的LM—PCR方法扩增40对乙肝相关性肝癌组织和配对癌旁组织中整合的HBV序列 ，PCR产物纯 化后以ABI公司3700测序仪进行全 自动测序，测序结果使用PubMedBLAST软件和BioEdit软件进行分析。结果 65．O％的肝 癌组织检测到整合 HBV病毒序列(26／40)，共检出37个不 同的HBV整合序列。67．5％的癌旁组织中检测到整合 HBV病毒 (27／40)，共检出68个不同的整合序列。平均每例肝癌组织中HBV整合序列检出数为 1．42个，而癌旁组织为2．52个 ，癌组织 低于癌旁组织。整合HBV序列发生A1762T／G1764A双突变在肝癌中的检出率高于癌旁组织，差异无统计学意义。结论 HBV 感染相关肝癌组织及癌旁组织中都检测到整合 HBV序列，再次表明整合是肝癌发生中的一个早期事件；而肝癌组织中整合HBV 序列有更高的A1762T／G1764A突变检出率，从一个新的侧面表明这些突变在病毒的致癌过程中具有重要作用。 【关键词】 肝细胞癌；乙肝病毒；整合；突变 【中图分类号】 R512．6 Identification ofintegratedhepatitisB virusmutationsin hepat0cellularcarcinoma ZHANGTing，XUQiang，YANGZi—wei，JIANGSu—zhen，LUFeng—min ， CHEN Xiang．reel‘ 。ZHUANG Hui (1．DepartmentofMicrobiology，PekingUniversityHealthScienceCenter，Beijing100191，China；2．DepartmentofInfectiousDiseases， NanfangHospital，SoathernMedicaZUniversity；Guangzhou510515，C^ina) 【Abstract】 Objective Toinvestigatetherelevanceofthebasiccorepromoter(BCP)mutantsofintegratedhepatitisBviurs(HBV)in livertissuesfrompatientswithhepatocellularcarcinoma(HCC)．Methods Alurepeatsequencepolymerasechainreaction(Alu—PCR) andligation—mediated(LM)一PCRwereusedtoidentifytheHBVintegrationin40pairsofHBV—relatedHCCtissuesandadjacentnon— tumorouslivertissues．ThePCRproductswerepurifiedandsubjectedtodirectsequencingbyABI3700Autosequencer．NCBIBLAST andBinEditsoftwarewereusedforanalysisofHBVsequence．Results In40HBsAgpositiveHCCsamples，26(65．0％)showedHBV intergationinhostgenome，withatotalo