白花败酱草中异牡荆苷和异荭草苷的高速逆流色谱分离和制备.pdfVIP

第33 卷 分析化学（FENXI HUAXUE ） 研究报告 第10 期 2005 年10 月 Chinese JOurnal Of Analytical Chemistry 1389 ~ 1392 白花败酱草中异牡荆苷和异荭草苷的高速逆流色谱分离和制备 1 1 1 2 ＊ 彭金咏 范国荣 吴玉田 陈洪渊 1 （第二军医大学药学院，上海市药物（中药）代谢产物研究重点实验室，上海200433 ） 2 （南京大学分析科学研究所，南京210093 ） 摘 要 应用高速逆流色谱分离制备白花败酱草中的异荭草苷和异牡荆苷，以乙酸乙酯= 乙醇= 水（4= 1= 5 ）为 两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，流速2. 0 mL / min ，主机800 r / min，检测波长254 nm 。以此分离 条件经一步洗脱，从300 mg 白花败酱草粗提物中制备得到异荭草苷24. 1 mg 和异牡荆苷49. 8 mg ，产物纯度经 1 13 HPLC 检测高达98. 0% ，结构经UV、IR、MS、H NMR 和 C NMR 鉴定，二者均为首次从败酱属植物中分离得到。 关键词 制备色谱，高速逆流色谱，异牡荆苷，异荭草苷，白花败酱草 ! 引 言 白花败酱草（Patrinia Villosa Juss ）系败酱科多年生草本植物，分布于我国华东、华中、华南及西南各 地，始载于《神农本草经》，后又被《中国药典》（1977 版）收载，具有清热利湿、解毒排脓、活血化瘀、清心 安神、促进肝细胞再生、改善肝功能、增强抑菌和抗病毒等作用。 异荭草苷和异牡荆苷（结构式见图1 ）广泛分布于天然产物当中［1 ~ 3］。现代药理研究表明，异荭草 ［4 ］ ［5 ］ 苷具有明显的保肝活性 ，异牡荆苷具有很强的抗氧化活性 。因此，如何快速、简便的从天然产物中 分离纯化高纯度异荭草苷和异牡荆苷，对进一步研究药效作用机制具有重要意义；同时有助于进行以异 荭草苷和异牡荆苷为指标性成分的药材及相关制剂的质量控制。 采用传统的柱色谱法从天然产物中制备这两种活性成分，不仅费时费力、污染环境，而且所用固定相 对样品有不可逆性吸附作用。高速逆流色谱（high-speed cOunter-current chrOmatOgraphy ，HSCCC ）不用任何 固体支撑体或载体，克服了传统分离方法对样品的不可逆性吸附作用，因而样品回收率高［8 ］。同时，还具 有应用范围广、仪器操作简单、分离量大等优点，因此被广泛应用于天然产物的分离制备［7 ~ 9 ］。 本实验采用1300 大孔吸附树脂从白花败酱草中制备得到粗提物，以此粗提物进行高速逆流色谱分 离纯化，经一步洗脱分离得到纯度高于98. 0% 的异牡荆苷和异荭草苷；制备量大、操作简单。目前，还 未见快速、大量地从白花败酱草中分离一种或多种成分的报道，也未见HSCCC 用于败酱属植物化学成 分分离的报道。 图1 异荭草苷和异牡荆苷结构式 Fig. 1 The chemical structures Of isOOrientin and isOvitexin # 实验部分 # . ! 仪器与试剂 TBE-300A 高速逆流色谱仪（深圳同田生化技术有限公司）；聚四氟乙烯管缠绕在3 个水平轴上形 成螺旋管（2. 6 mm i. d. ，分离体积300 mL ）；20 mL 进样圈。柱塞式泵（S 系列，北京圣益通技术开发有 2004-11-02 收