组织工程骨修复下颌骨缺损的临床研究(附3例报告告).pdfVIP

2011 国际暨全国第十一届头颈肿瘤学术大会论文集 中国 杭州 1.073g/l），骨髓与分离液的比例为1:2,2550r/min离心30min，吸取中间云雾 状细胞层，磷酸缓冲液（PBS）洗 1次，1550r/min离心后弃上清获取有核细胞， 7 2 以 2×10 细胞/cm 接种培养皿，进行体外细胞扩增，以成骨条件培养液予成骨 诱导。使用的培养液为 DMEM，加入 β-磷酸甘油钠（10nmol/L），地塞米松 -8 （10mol/L）,L-α-磷酸抗坏血酸（50μmol/L），L-谷氨酰胺（300mg/L），1， 25（OH） VD （10nmol/L）和10%自体血清。原代细胞接种后48h换液，细胞达 2 3 3 2 80%～90%融合后，采用0.25%胰酶消化，2×10 细胞/cm 传代培养，置于37℃， 5%CO 培养箱培养至第3代，血球板细胞计数。（2）成骨诱导后的hBMSC的成骨 2 表型鉴定：倒置显微镜观察细胞态，第 3 代细胞爬片，行钙结节四环素荧光染 色，免疫荧光法检测骨