人血浆与普罗帕酮对映体浓度的立体选择性高效液相色谱测定法.pdfVIP

扶所查文献可见，我国毒物分析目前尚存在以下问题：①文献量较少；②分析工作的深度 和广度不够。⑧cTA不同于法医毒分的一个重要方面是：臣有更强的时效性，这就要求CTA方 法应更为简便快速，但目前CTA文献所载方法，往往需经过繁琐的提取步骤才可进行检测， 在实际工作中，很难为临床危重中毒患者的抢救提供帮助。④分析方法推广使用的可能性较 差。CTA文献特别是定性分析文献所用仪器往往较为昂贲，不利于其在基层医院的开展，使其 推广受到限制。 由于目前毒物种类繁多、结构相近．以HPLC、GC等准确性高的方法进行主体与验证分析 的计划分析系统，将是进行临床未知毒物分析的一条捷径。同时，针对CTA时效性较强的特 ’ 点，开展GC、HPCE等方法直接进样技；忙的研究与应用，也将是今后CTA技术发展的一个趋 势。 厶廖浆中簧罗鹎嗣对睐体婆虐的立体 选择懂壹效液桓鱼谱测定法 陈冰蔡卫民万伟1 (南京军区南京总医院临床药理科210002 第二军大学药学院97届实习生) 已有PPF的HPLC分析及药动学研究的报道，但有关PPF对映体的研究尚未见报道。本文介 绍一种筒便、灵敏、准确的立体选择性高效液相色谱法测定血浆中PPF对映体的浓度． 1材料与方法 isothiocyanate Chemical (GITC)(SigmaCo，USA)；普罗帕酮标准品(广东省心血管病研究所临床药理室)； 普罗帕酮对映体(德国)；美托洛尔标准品(南京总医院中心仪器室提供)}美托洛尔对映本 (Hasaeer，Sweden)；乙腈(色谱纯，国产)；其余试剂为国产分析纯。 。 1．2仪器：Beckman 型积分仪。 ’ 1．3色谱条件：Hypersil 1．4血浆中PPF对映体HPLC测定方法的建立 40C吹干。 1．4。2 166 三乙胺的乙腑60p1，振荡混匀，常温下反应lh．40C吹干·加乙脯100vtl溶解进样。 2，1 洛尔分别配成5mg／L溶液。上述溶液经预处理和柱前衍生化后进样分析，根据各峰的保留时 11．2min。 定5次．计算批内RsD；再用本法分次测定5次，每次双份取平均值，计算批间RSD。结果s— 批间RSD= 2．71％。 --PPF平均圈收率为101．87％，R--PPF平均回收率为102．43％。 z．5 提取率：取PPF血浆质控品经上述预处理和柱前衍生化处理。另以甲醇配制PPF标准 品，不经提取，直接吹千后进行柱前衍生化，测定后以浓度对峰高作标准曲线，用于计算经提取 的血浆质控品浓度。两种对映体在三种浓度下的平均提取率分别为80．8％和83．1％。 2．6检出限和检出浓度：以信噪比为3计算对映体检出限和检出浓度，得：S--PPF最低检测 2nm。 2．7拆分效果：在本色谱条件下PPF两种对映体之问，内标两对映体之问的分离度均为1．6， s一美托洛尔与S--PPF、R一美托洛尔与R--PPF之间的分离度均为8．4。 2．8选择性和专属性：取地高辛，利多卡因．安定．普萘洛尔t地尔硫革等临床上中与PPF合 用的13种药物，分别配成与临床血药浓度相当溶液，用本法测定。除普萘洛尔外·其余药物对 PPF对映体峰均无干扰．另外硝苯地平对映体峰对内标峰有干扰。 3讨论 3．1我们以美托洛尔，安定、普萘洛尔作内标进行了考察，发现美托洛尔结构与PPF类似，两 者的衍生化反应也较相似，可使定量更为准确。但在文献报道的HPLC条件下，美托洛尔反应 不稳定，峰高差异较大，经过摸索，在反应液中加人1．25％的三乙胺作催化剂，内标反应比较 稳定。另外，我们发现，以乙腈代替甲苯作反应溶剂，反应后吹千较容易，并避免了甲苯带人的 1h条件下反应完全．燕现性好。 3．2 PPF血浆标本的预处理多采用碱化后有机溶剂萃取的方法。有人采用正庚烷一异戊醇 (99：1)提取，但正庚烷价格较贵；也有人用乙醚分次提