组蛋白高乙酰化介导的Egr-1结合促进gdnf基因高转录.pdfVIP

J South Med Univ, 2015, 35(5): 697-701 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2015.05.14 ·697 · 基础研究 组蛋白高乙酰化介导的组蛋白高乙酰化介导的Egr-Egr-11结合促进结合促进gdngdnff 基因高转基因高转录录 1 2 2 3 1 2 李周儒 ，刘 捷 ，雷 宇 ，倪海波 ，蔡红星 ，张宝乐 1 2 3 徐州医学院 法医学教研室，生物学教研室，江苏 徐州 221004 ；苏州大学附属第一医院神经外科，江苏 苏州 215006 摘要：目的 探讨大鼠C6 胶质瘤细胞中gdnf基因启动子II 区组蛋白H3K9 高乙酰化引发该基因高转录的机制。方法 采用 ChIP-PCR 技术检测了大鼠C6 星形胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中gdnf基因启动子II 区转录因子Egr- 1结合位点处H3K9 的乙酰化水平以及Egr- 1与该启动子的结合能力；利用Real-time PCR 和ChIP-PCR 技术，检测了组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜 黄素（Curcumin）和去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A （TSA）处理对C6 胶质瘤细胞中gdnf基因启动子II 区Egr- 1结合位点处 H3K9 的乙酰化水平、Egr- 1与之的结合能力以及该基因转录水平的影响。结果 较之正常星形胶质细胞，C6胶质瘤细胞中gdnf 基因启动子II 区Egr- 1 结合位点处H3K9 的乙酰化水平显著升高，并且Egr- 1 与之的结合能力也显著升高（P0.01）。当 Curcumin 显著降低了Egr- 1结合位点处H3K9 乙酰化水平时，Egr- 1与启动子II 区的结合量以及gdnf基因mRNA 的表达量都显 著下调（P0.05）；而当TSA 显著升高了Egr- 1结合位点处H3K9 乙酰化水平时，Egr- 1与启动子II 区的结合量以及gdnf基因 mRNA 的表达量都显著升高（P0.05）。结论 在大鼠C6 胶质瘤细胞中gdnf基因启动子II 区H3K9 高乙酰化介导的Egr- 1结合 量升高可能是其高转录的原因。 关键词：gdnf；启动子；组蛋白乙酰化；Egr- 1；胶质瘤 Increased Egr-1 binding to promoter induced by histone hyperacetylation promotes gdnf gene transcription 1 2 2 3 1 2 LI Zhouru , LIU Jie , LEI Yu , NI Haibo , CAI Hongxing , ZHANG Baole 1Department of Forensic Medicine, 2Department of Biology, Xuzhou Medical College, Xuzhou 221004, China; 3Department of Neurosurgery, First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou 215006, China Abstract: Objective To investigate the mechanism of high transcription of the glial cell-line derived neurotrophic factor (gdnf) gene induced by hyperacetylation of histone H3 lysine 9 (H3K9) at its promoter region II in rat C6 glioma cells. Methods The acetylation level of H3K9 at Egr-1 binding site in gdnf gene promoter region II and the binding capa