吉兰-巴雷综合征患者血清比较蛋白质组学研究.pdf

中文摘要 吉兰．巴雷综合1红．W-患者血清g的l口=。L田环日志伺皿，日Y 比较蛋白质组学研究 摘 要 目的：吉兰．巴雷综合征(GBS)是一种急性感染性多发 性神经病。它是临床上急性迟缓性瘫痪的常见病因之一。以 电生理学和神经病理学为依据，吉兰．巴雷综合征有两种主要 的类型：急性炎症性脱髓鞘性多发神经病(AIDP)和急性轴 索性运动神经病(AMAN)。在北美和欧洲吉兰．巴雷综合征的 发病以AIDP为主，神经电生理及神经病理检查示运动神经 脱髓鞘而在中国和日本相当多的吉兰．巴雷综合征患者以 AMAN发病，神经电生理及神经病理检查示运动神经轴索变 性。GBS病因和发病机制尚未完全明确，目前认为它是一种 自身免疫性疾病。病原微生物和神经细胞抗原的交叉反应性 及抗神经节抗体的存在部分解释了吉兰．巴雷综合征的发病 机制。而吉兰．巴雷综合征的分子学发病机制尚不明确，目前 缺乏有效的可靠的疾病相关的生物学标记。吉兰．巴雷综合征 患者血液、脑脊液中存在与发病有关的抗体、补体及细胞因 子等，近来以血浆交换疗法及大剂量免疫球蛋白治疗本病， 临床证明有效。新近出现的蛋白质组学技术是生命科学进入 后基因组时代的标志之一。蛋白质组是指“由一个细胞或组 织的基因组所表达的全部相应的蛋白质。蛋白质是基因功 能活动的最终执行者，是生命现象复杂性和多变性的直接体 现者，只有从蛋白质组学的角度对所有蛋白质的总和进行研 究，才能更加贴近对生命现象和本质的掌握，生命活动的本 中文摘要 质和活动规律才能找到答案。蛋白质组学可以比较两个或更 多的样品之间的蛋白质水平，是揭示疾病分子机制，发现疾 病标志性蛋白，寻找新的药物靶标的理想工具。随着蛋白质 组学及其技术在人类疾病和临床医学的应用与发展，“临床 蛋白质组学应运而生。临床蛋白质组学通过对正常个体及 病理个体间的蛋白质组比较分析可能找到某些“疾病特异性 的蛋白质分子”。血液是取材容易、应用广泛、富含蛋白质 的研究样品，其蛋白水平的变化与多种疾病有关。 本研究拟通过对吉兰．巴雷综合征患者与对照者血清的 比较蛋白质组学研究，通过定量分析和比较研究在疾病与非 疾病状态下蛋白质表达的变化，发现并鉴定疾病过程中的可 能蛋白质，探讨吉兰．巴雷综合征的分子学发病机制。 方法：1研究对象：在河北医科大学第二医院就诊的 样本。2实验步骤：将留取的血液样本离心，取血清置于．80 ℃冰箱低温保存；去除高丰度蛋白(以bekman公司去除高丰 度蛋白试剂盒去除血清中13种高丰度蛋白)；对提取的蛋白 进行双向凝胶电泳：第一向等电聚焦电泳、第二向垂直 2D Elite软件进 扫描双向电泳凝胶，所得图谱以ImageMaster 行图像分析；将感兴趣蛋白质点从考马斯亮兰染色的凝胶上 切下，胶内蛋白质酶解； 行鉴定。 结果：吉兰．巴雷综合征患者与对照者的血清对比，发现 14种蛋白及其它们的亚型或前体有显著的改变。其中吉兰． 中文摘要 巴雷综合征患者血清中的上调蛋白有11种包括：Q1．抗胰凝 乳蛋白酶、(肌动蛋白)凝溶胶蛋白亚基前体、非复杂性维 生素D结合蛋白晶体结构 重链A、补体成分C4B、人类 132．糖蛋白1晶体结构(载脂蛋白H)重链A、血浆铜蓝蛋 白、补体C3c重链A、人类补体因子B、人类补体成分C3c 重链B、a2．巨球蛋白前体、补体成分1s亚成分；下调的蛋 白有3种包括：纤溶酶原、载脂蛋白E前体、甲状腺素转运 蛋白共价二聚体重链A。 结论：目前，关于吉兰．巴雷综合征患者与对照者的血清 蛋白质组学研究尚未见报道。此研究结论中的14种蛋白也许 与吉兰．巴雷综合征的发病机理相关，它可能为探讨疾病的发 病机理提供依据，为疾病的早期诊断提供分子标志，为评价 吉兰．巴雷综合征的治疗及预后提供依据。这将为我们今后探 讨吉兰．巴雷综合征提供新的研究方向。 关键词：吉兰．巴雷综合征；血清；双向凝胶电泳；质谱； 蛋白质