重组腺相关病毒对内皮细胞增殖和凋亡的影响.pdfVIP

·1690· ·胸一心夕b禾st-· 重组腺相关病毒对内皮细胞增殖和凋亡的 影响 翟慧 向阳 杨毅宁 马依彤 李晓梅 陈邦党 刘芬 张金宇 【摘要】 目的通过重组9型腺相关病毒(rAAV9)载体介导R65核酶基因对体外培养人脐静 脉内皮细胞(HUVECs)进行转染，观察R65核酶基因表达对高脂血清刺激后HUVECs增殖和凋亡的 影响。方法体外培养HUVECs，高脂血清诱导建立动脉粥样硬化内皮损伤模型，重组rAAV9介导 抗核因子(NF)一KB核酶基因(rAAV9一R65)腺相关病毒载体转染HUVECs。实验分为3组：(1)正常 对照组；(2)高脂血清诱导组；(3)高脂血清诱导+病毒转染组。通过Westernblot检测HUVECs细 胞中p65核蛋白的表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测NF．KB信号通路下游肿瘤坏死因子 (TNF)一d和白细胞介素(IL)-6的变化；AlamarBlue法检测rAAV9．R65转染后HUVECs的体外增 殖；rAAV9一R65转染细胞96 h后流式细胞仪检测高脂血清刺激后HUVECs凋亡率的变化。结果