一种新型光谱表面等离子体共振二维探测方法在DNA微阵列中的应用.pdfVIP

第30卷，第1期 光谱学与光谱分析 20l and 0年1月 SpectralAnalysis January，2010 Spectroscopy 一种新型光谱表面等离子体共振二维探测方法 在DNA微阵列中的应用 刘 乐1，何永红h，马绥华1，鲁卫平2，赵欣3，张雅鸥3，郭继华1 1．清华大学深圳研究生院光学检测‘亏成像实验摩，广东深圳 518055 2．第j军医大学大坪医院检验科，重庆400042 3．清华大学深圳研究生院生命学部．广东深圳518055 plas— 摘要在此前曾提出过一种新型二维折射率探测方法——并行扫描光谱表面等离子体共振(sudace mon 维窄间信息，进而通过计算可得到折射率的一维分布信息。通过一维扫描，就能够得到整个被扫描区域内的 折射率二维分布信息。该方法具有高灵敏、高通量的优点，适合微阵列(mieroarray)的检测。并完善了-这种 方法的数据处理过程，使用空气折射率作为参考，消除了无法精确控制入射角的难题。使用该方法对手工点 制的军团菌mipDNA探针微阵列进行了检测，证明了这种方法高灵敏无标记地探测微阵列的町行性。我们 得到的军团菌mipDNA探针制备浓度与其等效折射率的关系，这对基于SPR的微阵列技术的发展有着重 要的参考意义。 关键词SPR；光谱；成像；微阵列；生物芯片 中图分类号：0436文献标识码：A DOI：10．3964／j．issn．1000-0593(2010)01—0154—05 方法都需要对样品或探针分子进行标记，会影响被测反应， 引 言 增加样品制备工序和造价。SPR技术则是高灵敏、无标记地 检测微阵列的合适方法。 表面等离子共振技术，是一种高灵敏无需标记的光学表 从探测维度上说，SPR传感方法可以分为点探测和二维 面探测方法。其原理是空问电磁波满足一定共振条件时，能 探测。目前点探测SPR传感方法已经成功应用于物理、生 量从事间电磁波转移到表面等离子体波(surfaceplasma物、化学等领域【l‘6]。而为了探测微阵列，需要基于SPR的 二维探测技术。 wave，SPW)，从而表现为反射光的振幅和相位的急剧变化。 mierosco— 丽由于SPW的衰逝波性质，这种共振条件对被测面的微小 Rothenhausler等提出了SPM(surfaceplasmon 变化十分敏感，于是通过反射光的振幅和相位的变化，可以 PY)口]，固定波长和入射角直接用CCD成像。但是这种方法 高灵敏地探测被测面的折射率变化。再通过被测面上的各种 所成图像的厌度值并不与折射率线性对应，因而只能定性而 功能膜，就可以把其他各种参繁的变化转为折射率的变化， 非定量地测蹙折射率的变化；而且这种方法只能测鼍不大的 从而实现对各种参虽的高灵敏探测。 折射率变化范围，超过这个范围，2个不问的折射率可能对 微阵列(microarray)技术，也称为牟物芯片(biochip)技应相M的灰度值。陈义等使用这种SPM进行r应用【8]，并 术，是一种生物医学中使用的高通量的枪测技术。在面积不 且还使用了另一种白光照明的彩色SPlVIE…，但是同样不能 大的基片表面上有序地点阵排列一系