一种新型的低等真菌永久性玻片制作方法.pdfVIP

沈阳农业大学学报，2004一02。35(1)：62 of J0唧alshenyangA酣cultuIalunive璃时，2004—02，35(1)：62 关键词：低等真菌；玻片制作；永久性玻片；石蜡切片 5 中图分类号：Q939 文献标识码：A 文章编号：1000一1700(2004)01—0062—0l 一种新型的低等真菌永久性玻片制作方法 段玉玺1，陈立杰1，朱桂清‘，姜 丽2 n沈阳农业大学植物保护学院，辽宁沈阳u0161；2沈阳出入境检验检疫局．讧宁沈阳1i0016) 在过去的教学实践中，低等真菌的玻片制作一直是一个难以解决的问题。因为多数低等真菌的菌丝较 粗，而且菌丝又没有隔膜，菌体较为脆弱，在制片过程中很容易被压破，造成菌体的原生质向外溢出，使菌 体的原有的形态发生改变，失去玻片的使用价值。同时，由于这些低等真菌的含水量较大，这些真菌的菌丝 在制作玻片的乙醇脱水过程中极易发生皱缩，降低玻片的质量。基于过去低等真菌的永久性玻片制作方法复 杂，又存在缺陷，作者介绍一种新型低等真菌的永久性玻片制作方法供有关同行参考。 l材料与方法 1．1试验材料 1．2方法 1．2．1试验准备新购置的盖玻片和载玻片需在洗液中浸泡后流水冲洗晾干备用。将石蜡放人一培养皿中加 热融化至无气泡后冷却备用。 1．2．2固定和脱水当在培养基上培养的瓜果腐霉和水霉生长到产生游动孢子囊和游动孢子时，将菌落分别 转至含FG4一l固定剂的小培养m中。把小培养皿置于被过量的95％乙醇饱和的密闭容器中，将小培养皿盖 打开一个小缝，在400c下保温1 菌体，此时把培养皿盖打开放在40℃的恒温箱中3h以上。 1．2、3永久性玻片制作将直径lcm的铜管加热，在备好的培养皿中蘸取石蜡，然后迅速在载玻片的中央 制成一个蜡环。在蜡环的中央点一滴纯甘油，在解剖镜下用镊子将已脱水的瓜果腐霉或水霉的菌体撕开，选 取在形态上有代表性的菌丝转入蜡环中央的纯甘油中。在解剖镜下将藏丝压人甘油液的底部，用细的解剖针 把菌丝摆成自然生长状态，加上盏玻片后，置于90℃的屣片台上，待蜡环融化后，迅速将玻片移出展片 台，冷却后用封固剂封固两遍。 2结果与讨论 本方法是采用甘油作浮载剂，通过蜡环支撑，防止了菌体的破裂和内容物的外溢。脱水过程简便快捷， 经过这种方法制作的低等真菌的永久性玻片结实耐用。由于低等真菌的菌体比高等真菌的菌体脆弱，菌丝又 较粗，为了防止了菌体的破裂，过去这类真菌的永久性玻片的制作多采用乳酚油作浮载剂，不能象石蜡切片 那样直接用封固剂作浮载剂，因封固剂仅在盖玻片的周围封固，在使用的过程中浮载剂很易泄露，丧失玻片 的使用价值。经过反复试验，本方法是低等真菌永久性玻片制作的理想方法，值得有关研究人员尝试使用。 参考文献： [1】方中达．植病研究法【M】北京：农业出版社．1979．304—323 [2】俞太绂植物病理学和真菌学技术汇编(卷2)【M]北京：人民教育出版社，1977．52l一535． CNPlallt 【3]Acl0S Editian)[M】 pre鸥，1997．245—278 Pathol嘧r(F0uItll Be《ing：^枷defnic 收稿日期：舢一嘶一12 基盒项目：国采自然科学基金【3017惦蹦．203删J。辽宁省骨干教师资助课题 作者简介：段玉望【19“一)．男．沈阳农业大学教授，博士，从事植物病理学和檀物线虫学的教学和研究工作。 (责任编辑 于洪飞】 TECHNIQUE ●实验技术EXPERIMENTAL 万方数据 一种新型的低等真菌永久性玻片制作方法 作者： 段玉玺， 陈立杰， 朱桂清， 姜丽 作者单位： 段玉玺,陈立杰,朱桂清(沈阳农业大学,植物保护学院,辽宁,沈阳,110161)， 姜丽(沈阳出入 境检验检疫局,辽宁,沈阳,110016) 刊名： 沈阳农业大学学报 英文刊名： JOURNAL OF SHENYANG AGRICULTURAL UNIVERSITY 年，卷(期)：