分子生物学问答题整理.docVIP

1.简述染色体包装模型。（4分）(PPT) 2.简述原核与真核基因结构的特点。（6分） 3.简述遗传密码的特点。（4分） 遗传密码的基本特性：遗传密码编码在核酸分子上，其基本单位是按照5′→ 3′方向编码、不重叠、无标点的三联体密码子，密码的简并性，密码的变偶性，遗传密码的通用性和变异性，遗传密码的防错系统。共有64个三联体密码子，除三个终止密码外，其余61个密码子编码20种氨基酸，所以，许多氨基酸不只一个遗传密码。同一种氨基酸具有两个或更多个密码子的现象称为密码子的简并性(degeneracy)。对应于同一种氨基酸的不同密码子称为同义密码子(synonymous codon)，只有色氨酸与甲硫氨酸仅有1个密码子。 (1)密码无标点：从起始密码始到终止密码止，需连续阅读，不可中断。增加或删除某个核苷酸会发生移码突变。 (2)密码不重叠：组成一个密码的三个核苷酸只代表一个氨基酸，只使用一次，不重叠使用。 (3)密码的简并性：在密码子表中，除Met、Trp各对应一个密码外，其余氨基酸均有两个以上的密码，对保持生物遗传的稳定性具有重要意义。 (4)变偶假说：密码的专一性主要由头两位碱基决定，第三位碱基重要性不大，因此在与反密码子的相互作用中具有一定的灵活性。 (5)通用性及例外：地球上的一切生物都使用同一套遗传密码，但近年来已发现某些个别例外现象，如某些哺乳动物线粒体中的UGA不是终止密码而是色氨酸密码子。 (6)起始密码子AUG，同时也代表Met，终止密码子UAA、UAG、UGA使用频率不同。 4.用图绘制真核基因的精细结构。（6分） 5.简述PCR反应的系统组成和参数设置。（4分） 见生物工程书 6.简述探针的类型。（5分） 答:1,cDNA探针:通过逆转录获得cDNA后,将其克隆于适当的克隆载体,通过扩增重组质粒而使cDNA得到大量的扩增.提取质粒后分离纯化作为探针使用.它是目前应用最为广泛的一种探针.2,基因组探针:从基因组文库里筛选得到一个特定的基因或基因片段的克隆后,大量扩增,纯化,切取插入片段,分离纯化为探针.3,寡核苷酸探针:根据已知的核酸顺序,采用DNA合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段作为探针.4,RNA探针:采用基因克隆和体外转录的方法可以得到RNA或反义RNA作为探针.答:某些质粒带有大肠杆菌的半乳糖苷酶基因片段,在半乳糖苷酶基因的基因区外又另外引入了一段含多种单一限制酶位点的DNA序列.这些位点上如果没有克隆外源性DN**段,在质粒被导入lac-的大肠杆菌后,质粒携带的半乳糖苷酶基因将正常表达,与大肠杆菌的半乳糖苷酶基因互补,产生有活性的半乳糖苷酶,加入人工底物X-gal和诱导剂IPTG后,出现蓝色的菌落.如果在多克隆位点上插入外源DN**段,将使lac Z基因灭活,不能生成半乳糖苷酶,结果菌落出现白色.由于这种颜色标志,重组克隆和非重组克隆的区分一目了然.E．coli DNA聚合酶I是多功能酶，具有：DNA聚合酶活性，能按模板要求，以5’→ 3’方向合成DNA，在DNA复制中，常用以填补引物切除后留下的空隙；5→3’外切酶活性，DNA复制后期，用于切除RNA引物；3→5’外切酶活性，用以校对复制的正确性，当出现错配碱基时，切除错配碱基直到正确配对为止；DNA聚合酶I不是DNA复制和校正中的主要聚合酶，它的功能主要是修复。 翻译后的加工过程可以使蛋白质的组成更加多样化，导致其结构上呈现出更复杂的构象变化，以适应更多生物功能的需要。加工修饰过程有两个方面：①对氨基酸残基的侧链基团进行修饰；②在蛋白质成熟过程中多肽链上部分肽段被切除。特异的修饰和加工过程与这些蛋白质的合成部位，运送的靶部位有关。实际上，加工过程在多肽链合成开始时就随之进行了。细胞质中的蛋白质从核糖体上释放后即可行使其功能；而运送到其他细胞器中的蛋白质则在运送过程中发生着许多修饰过程。 17．阐述基因概念的变化。（12分） 基因的最初概念来自于孟德尔的“遗传因子”，他认为生物性状的遗传是由遗传因子控制的，性状本身不能遗传。1909年， 丹麦学者约翰生（W.Johannsen）RNA聚合酶的主要功能和种类。（简答，8分） 22．基因转录是如何起始的?（8分） 23．简述DNA复制的忠实性机制。（6分） 24．以乳糖利用为例说明阻遏蛋白的负性调控和CAP的正性调控。（11分） 26.简述核小体结构要点 。（简答，5分） （PPT） 27．参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能?（简答，6分） 翻译过程需要如下因素：一些被称作起始因子(initiation factor，IF)的非核糖体蛋白质，参与了蛋白质合成的起始。真核生物蛋白质合成的起始需要更多的蛋白质因子eIF参与作用。当起始过程结束