问充质干细胞治疗糖尿病.789doc.docVIP

间充质干细胞MSCs治疗糖尿病的机制 间充质干细胞MSCs是来源于中胚层具有多向分化潜能的干细胞，将同种异体甚至异种异体的MSCs移植入宿主体内，在一定诱导条件下，如微环境中的细胞因子、多维分化信号、细胞外基质成分及同种或异种细胞间接触等。 MSCs可以分化成具有中胚层、外胚层或内胚层特点的细胞。并参与宿主组织的构成p】。已经证实来源于备组织中的MSC s均可以分化为有功能的胰岛样细胞。同基因或异基因M SCs移植给糖尿病鼠.可快速降低血糖水平，有效逆转其高血糖症状。但是其机制目前尚不确定。本文就目前可能涉及的，几种机制：横向分化机制、细胞融合机制、DNA甲基化机制、旁分泌机制、内源性干细胞修复机制的研究进展进行综述。 1横向分化机制. 一些研究认为，来自中胚层的MSCS治疗糖尿病是在微环境作用条件下跨胚层横向分化为胰岛样细胞的结果。提取CRE-LOXP转基因鼠骨髓MsCs后转染EGFP, CRE的表达,可导致EGFP的持续表达。将骨髓MSCS移植给受体鼠后，其胰腺内有EGFP表达的β细胞。同时将NS2一CRE转基因鼠的骨髓MSCs移植给ROSA-STOPLOX-EGFP转基因鼠.若移植的MSCs与受体鼠胰岛细胞融合，会由CRE表达激活EGFP持续表达，若移植的MSCs在胰腺内发生横向分化，受体鼠细胞由于无CRE表达，则EGFP表达不被激活。结果显示受体鼠体内无EGFP表达，排除了融合的可能，证实骨髓MsCs横向分化为胰腺β细胞。而给骨髓MSCs转染β细胞发育途径中的关键转录因子PDX-1,也可促进M SCs横向分化为有功能的胰岛样细胞。 利用含有神经分化因子等的4步分化方案来评价人的MSCs分化成胰岛样细胞的潜能，结果也表明MSCs能够横向分化为胰岛样细胞。上述研究结果表明横向分化机制是MSCs诱导分化成为胰岛样细胞的主要机制。但是MSCs在横向分化为胰岛样细胞的过程中，β细胞发育途径中的关键转录因子PDX-1、PDX-4、NGN-3等是否也像正常胰腺发育过程一样的的表达还有待于进一步的研究。 2细胞融合机制 MSCs具有选择性地迁移到受体器官损伤部位的特性，迁移至损伤组织的MSCs是否与体细胞在特定情况下发生细胞融合而具有体细胞的功能?这可能是MSCs治疗糖尿病的另一种机制。为验证这一假设，给雌性小鼠骨髓MSCs标记EGFP和嘌呤霉素抗性基因，与雄性小鼠胚胎干细胞共同培养，培养基中加入嘌呤霉素，培养后表达EGFP和嘌呤霉素抗性的MSCs细胞群形态和表型与胚胎干细胞相似，且其具有MSCs和胚胎千细胞的基因表型。 MSCs来源的不同细胞群DNA倍性分析均为2倍体以上。还有4倍体和6倍体细胞群。4倍体的细胞群都有XXXY的核型出现．染色体数目多为78和79。该实验支持骨髓MSCs通过与不同组织细胞发生融合而实现向该组织分化。其他学者的研究也证实了成体干细胞可以通过与组织细胞发生融合实现向该组织分化，从而获得相应表型。以上研究说明，细胞融合是细胞与细胞联合培养中存在的现象。但是，是否MSCs注入糖尿病小鼠后引起血糖下降，糖尿病症状改善是由于MSCS与宿主胰腺β细胞融合后具有β细胞的功能?还有待于进一步的研究。 3 DNA甲基化机制 细胞分化过程中，DNA甲化会发生编CpG岛胞嘧啶甲基化或者去甲基化，致l982年Sagel等提出DNA甲基化的改变能促进细胞分化的这一理论，给种新的研究思路。研究MSCs机体肿MSCS、ECC、机体肿瘤细胞的DNA甲基转移酶抑制剂处理的DNA甲基化与细胞分化有关。对人胚胎干细胞分化过程中的0CT4、ANOG启动子区域的基化水平，存在基因甲基。将起源于滑膜的MSCs诱导成软骨，MSCs相关基因的甲基化程度，结果MSCs向软骨分化。这表明MSCs的分化过程确甲基化的改变。而控制MSCS向胰岛PDX-1、PDX--3等的DNA甲基化改变是否调控着其向胰岛 4旁分泌机制 如果仅通过细胞融合或横向分化来解释MsCsMSCS移植入心肌梗死的大鼠研究发现，植入的MSCs通MSCs可能通过旁分泌机制在组织修MSCs在体外缺时能够-些细胞因如IF—l、bFGF、VEGF和HGF，具有防细胞凋亡、促进血管、增加循充质千细胞聚集到受伤组织的作用。用MSCs 利用蛋白质组学技术鉴定，结果显示，大部分MSCs的分。因此推测．移MSCs能够迁移到受伤的胰腺区域，与局部微 5