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真菌--李若瑜.ppt
真菌感染诊疗进展 北京大学第一医院 北京大学真菌和真菌病研究中心 李若瑜 2005年12月13日 真菌感染的流行特点 国内侵袭性真菌感染的发病情况 ——协和医院感染科 Aspergillus Cryptococcus 条件致病菌 临床常见的条件性真菌感染 念珠菌病:最常见,占血源感染的第4位。非粒缺病人, SICU常见(肾衰、插管)。 曲霉菌病:血液系统恶性肿瘤病人发病 可达30%,BMT常见合并症。 隐球菌病: 在艾滋病人发病率为10-20%。 接合菌病(毛霉病): 多见于重症糖尿病和烧伤、器官移植病人。 临床有增多趋势的条件致病性真菌 非白念念珠菌感染 (近平滑、光滑增加) 毛孢子菌感染 地霉感染 镰刀菌感染 枝顶孢霉感染 暗色真菌感染 马内菲青霉病 真菌感染的诊断 真菌病诊断 真菌感染的实验诊断方法及问题 显微镜检查-阳性率? 培养-时间?敏感性?意义? 血清学-敏感性?特异性? 分子生物学-标准化? 真菌病的非培养诊断—— 乳胶凝集试验检测新生隐球菌抗原 ELISA法检测念珠菌和曲霉抗原 β -1,3葡聚糖检测 免疫组化、原位杂交技术用于深部真菌病诊断 寻找种特异性引物并应用于菌种鉴定 ——曲霉、外瓶霉、镰刀菌、孢子丝菌等 PCR??稳定、特异问题 新生隐球菌乳胶凝集试验 检测曲霉GM抗原的ELISA试验 GM抗原检测用于侵袭性曲霉病诊断 与临床诊断和疗效反应有良好的一致性。 检测方法有ELISA、放射免疫分析(RIA)和乳胶凝集试验等。 Platelia试剂盒采用ELISA方法,敏感性~80%,特异性80%。儿童假阳性10%。 Cut-off值影响结果—0.5:早期诊断,特异性差;1.5:特异性提高。可动态观察。 Dr.Maschmeyer G. in 2nd Trends in Medical Mycology, 23-26 October 2005, Berlin 曲霉抗原ELISA检测方法(Platelia试剂盒) PCR技术用于诊断 PCR过筛试验诊断IA 每周监测2次—通用引物; 确定采用巢式和实时定量; 敏感性100%,特异性65%; 早于临床症状2天,早于确诊9天; 动态观察持续阴性可排除; PCR扩增ITS及18S区基因片段 动物模型中巢式PCR方法检测的灵敏度 确诊和拟诊曲霉感染患者的诊断情况 完成全基因序列测定的病原真菌 白念珠菌等致病性念珠菌 新生隐球菌 粗球孢子菌 烟曲霉、构巢曲霉 组织胞浆菌 卡氏肺孢子虫 突破方向— 对基因组序列和功能的了解,找出特异处 改进目前方法,提高敏感性 Real-time PCR 多重PCR 芯片技术 其它特异抗原 PA诊断时间表与治疗关系 PCR/CT GMAg X-ray glucan 培养/组织学 1-2 3 5-6 9 15 天数 深部真菌感染诊断—需要解决的问题 重视基础真菌学检验,将直接镜检与真菌培养方法联合应用; 注重寻找组织学证据这一诊断的“金标准”,寻找病原真菌入侵机体的直接证据; 对诊断新方法应严格评价并对其进行标准化和规范化; 加强临床与实验室之间、实验室与实验室之间的交流与协作。 真菌感染的治疗 临床对抗真菌治疗的需求 早期确切诊断 对病原体的精确鉴定 体外药敏试验方法的建立 高效低毒的抗真菌药物 合理正确选择抗真菌药物 抗真菌药物作用机制 抗真菌药物的进展— 降低多烯类药物的毒副作用 二性霉素B脂质剂型(L-AmB、ABCD、ABLC),高效低毒 唑类药物的优化和开发 氟康唑和伏立康唑(Voriconazole,VOR) 伊曲康唑和泊沙康唑(Posaconazole,Posa) 发现新型抗真菌药物(作用于细胞壁) 1,3葡聚糖合成酶:卡泊芬净(Caspofungin,CASP)、 米卡芬净(Micafungin)和安尼杜拉芬净(Anidulafungin ) 几丁质合成酶:尼可霉素Z (Nikkomycin Z) 两性霉素B的三种脂质基制剂 两性霉素B脂质体(AmBisome):包裹在含磷脂的脂质微粒中 两性霉素B胶状分散剂(Amphocil, Amphotec, ABCD):与胆固醇硫酸酯结合形成小脂质片状物 两性霉素B脂质体复合物(Abelcet, ABLC):与磷脂复合构成带状结构 新型抗真菌药物 三唑类: --伏立康唑Voriconazole --泊沙康唑 Posaconazole 细胞壁成分合成抑制剂 --β-1,3葡聚糖合成酶抑制剂:肺白菌素、棘白菌素 -- 几丁质合成酶
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