槲皮素对人内皮祖细胞增殖和凋亡的影响及机制的研究.pdf

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槲皮素对人内皮祖细胞增殖和凋亡的影响及机制研究 摘 要 的保护作用,并探讨可能机制。方法:(1)外周单个核细胞的分离:抽取 沉淀法联合密度梯度离心法分离获得单个核细胞,并进行细胞活力计算(死 细胞蓝色、活细胞不着色),活细胞占98%以上可进行接种,上述过程在四 M199培养基,添加10%胎 蛋白包被的25cm2培养瓶中(4嵋/Cm2),加入5ml lng/ml,置于 小时后取未贴壁细胞继续培养至第四天,用磷酸盐缓冲液洗掉未贴壁细胞, 加培养液培养至第七天,进一步用磷酸盐缓冲液洗掉未贴壁细胞,贴壁细 胞,制成细胞悬液计数,随机分为空白对照组(不加干预);Que组(分别 过氧化氢(H202));Que+H202组(先加入Que 120pmol/L,后加5001maol/L EPCs 1 蛋白表达,加入JNK激动剂Anisomycin0}tmol/L后用流式细胞仪观察各 显的时间和浓度依赖性,与H202组比较,差异有显著统计学意义(尸 的Que作用下,凋亡率依次为(27.43 学意义(PO.01);与90pmol/L Que+H202 Que+H202组比较,120“rnol/L 胞核出现棕黄色颗粒,随着槲皮素浓度的增加,p-JNK阳性表达产物逐渐 加,Anisomycin卅孤e(60pmol/L、90pmoFL、1 2 度的Que抑制EPCs的增殖;在氧化应激条件下,槲皮素呈浓度依赖性的 信号通路有关。 关键词:槲皮素;内皮祖细胞;增殖;凋亡 Effectsand mechanismof on and possible quercetinproliferation ofhumanendothelialcells apoptosis progenitor the effectsof Abstract:Objective:Toinvestigate protective thecultured endothelial oxidative progenitorcells(EPCs)followinginjury induced free tdedtoelucidatetheir byoxygenradical,and possible mononuclearcells mlhuman mechanism.Methods(1)theseparation:60 umbilicalcordbloodwascollectedfrom of womenfull placentahealthy with term 201U l pregnancy,commonheparinanticoagulation(byperm1),total mononuclearcellswereisolated

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