槲皮素对人内皮祖细胞增殖和凋亡的影响及机制的研究.pdf

槲皮素对人内皮祖细胞增殖和凋亡的影响及机制研究 摘 要 的保护作用，并探讨可能机制。方法：(1)外周单个核细胞的分离：抽取 沉淀法联合密度梯度离心法分离获得单个核细胞，并进行细胞活力计算(死 细胞蓝色、活细胞不着色)，活细胞占98％以上可进行接种，上述过程在四 M199培养基，添加10％胎 蛋白包被的25cm2培养瓶中(4嵋／Cm2)，加入5ml lng／ml，置于 小时后取未贴壁细胞继续培养至第四天，用磷酸盐缓冲液洗掉未贴壁细胞， 加培养液培养至第七天，进一步用磷酸盐缓冲液洗掉未贴壁细胞，贴壁细 胞，制成细胞悬液计数，随机分为空白对照组(不加干预)；Que组(分别 过氧化氢(H202))；Que+H202组(先加入Que 120pmol／L，后加5001maol／L EPCs 1 蛋白表达，加入JNK激动剂Anisomycin0}tmol／L后用流式细胞仪观察各 显的时间和浓度依赖性，与H202组比较，差异有显著统计学意义(尸 的Que作用下，凋亡率依次为(27．43 学意义(PO．01)；与90pmol／L Que+H202 Que+H202组比较，120“rnol／L 胞核出现棕黄色颗粒，随着槲皮素浓度的增加，p-JNK阳性表达产物逐渐 加，Anisomycin卅孤e(60pmol／L、90pmoFL、1 2 度的Que抑制EPCs的增殖；在氧化应激条件下，槲皮素呈浓度依赖性的 信号通路有关。 关键词：槲皮素；内皮祖细胞；增殖；凋亡 Effectsand mechanismof on and possible quercetinproliferation ofhumanendothelialcells apoptosis progenitor the effectsof Abstract：Objective：Toinvestigate protective thecultured endothelial oxidative progenitorcells(EPCs)followinginjury induced free tdedtoelucidatetheir byoxygenradical，and possible mononuclearcells mlhuman mechanism．Methods(1)theseparation：60 umbilicalcordbloodwascollectedfrom of womenfull placentahealthy with term 201U l pregnancy,commonheparinanticoagulation(byperm1)，total mononuclearcellswereisolated