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槲皮素对人内皮祖细胞增殖和凋亡的影响及机制研究
摘 要
的保护作用,并探讨可能机制。方法:(1)外周单个核细胞的分离:抽取
沉淀法联合密度梯度离心法分离获得单个核细胞,并进行细胞活力计算(死
细胞蓝色、活细胞不着色),活细胞占98%以上可进行接种,上述过程在四
M199培养基,添加10%胎
蛋白包被的25cm2培养瓶中(4嵋/Cm2),加入5ml
lng/ml,置于
小时后取未贴壁细胞继续培养至第四天,用磷酸盐缓冲液洗掉未贴壁细胞,
加培养液培养至第七天,进一步用磷酸盐缓冲液洗掉未贴壁细胞,贴壁细
胞,制成细胞悬液计数,随机分为空白对照组(不加干预);Que组(分别
过氧化氢(H202));Que+H202组(先加入Que
120pmol/L,后加5001maol/L
EPCs
1
蛋白表达,加入JNK激动剂Anisomycin0}tmol/L后用流式细胞仪观察各
显的时间和浓度依赖性,与H202组比较,差异有显著统计学意义(尸
的Que作用下,凋亡率依次为(27.43
学意义(PO.01);与90pmol/L Que+H202
Que+H202组比较,120“rnol/L
胞核出现棕黄色颗粒,随着槲皮素浓度的增加,p-JNK阳性表达产物逐渐
加,Anisomycin卅孤e(60pmol/L、90pmoFL、1
2
度的Que抑制EPCs的增殖;在氧化应激条件下,槲皮素呈浓度依赖性的
信号通路有关。
关键词:槲皮素;内皮祖细胞;增殖;凋亡
Effectsand mechanismof on and
possible quercetinproliferation
ofhumanendothelialcells
apoptosis progenitor
the effectsof
Abstract:Objective:Toinvestigate
protective
thecultured
endothelial oxidative
progenitorcells(EPCs)followinginjury
induced free tdedtoelucidatetheir
byoxygenradical,and possible
mononuclearcells mlhuman
mechanism.Methods(1)theseparation:60
umbilicalcordbloodwascollectedfrom of womenfull
placentahealthy with
term 201U l
pregnancy,commonheparinanticoagulation(byperm1),total
mononuclearcellswereisolated
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