利用原子力显微镜的研究细胞弹性.pdfVIP

中文摘要 摘 要 癌症是威胁人类生命最严重的疾病之一，氧自由基在癌症的发生过程中起着 重要作用。细胞的弹性既能影响细胞的生理功能，也能反映细胞的病理变化。原 子力显微镜（Atomic Force Microscopy ，AFM ）能对细胞进行形态扫描和力曲线测 量，通过相关理论模型分析力曲线得到细胞的弹性。本文详细叙述了 AFM 力曲线 的常见分析模型，对细胞弹性的具体计算方法给出了一定的创新，并且利用AFM 研究肿瘤细胞的弹性，以及不同浓度的双氧水对人脐带血管内皮细胞的弹性影响。 本文目的是为肿瘤的研究工作、为研究氧 自由基对细胞的损伤提供一定的理论数 据和基础研究。本文主要内容和结果如下： ① 利用不同的力曲线分析模型分析力曲线求解细胞的弹性，通过比较可以看出， 模型的不同会在一定程度上影响数据分析结果，即使是用同一个分析模型，计 算方法的不同也会影响数据分析结果。本文给出了一个较为优化的计算方法， 可以显著减小实验结果的方差。 ② 利用 AFM 对肺癌细胞 a549 进行细胞形态扫描和力曲线测量。从 AFM 扫描图 上可以看出该细胞呈现出纺锤状，其中长轴约为40-60μm 细胞核高度约为3μm 。 而且从 AFM 扫描图还可以看到细胞表面并不是光滑平整的，在细胞边缘有一 些束状结构，这些结构是细胞浅层的一些骨架结构。对肺癌细胞施加不同的加 载速率（0.8-80μm/s ）进行AFM 力学测量时，发现活细胞表面的弹性模量会随 着加载速率的增加而增大，但是当细胞固定后，其弹性则不会发生变化，保持 在 50kPa 左右，比生理条件下肿瘤细胞的弹性大一个数量级。 ③ 研究双氧水对细胞的影响。用不同浓度的双氧水处理人脐带血管内皮细胞，利 用 MTT 和 AFM 实验分别测量细胞凋亡情况以及细胞弹性的变化。实验结果表 明，低浓度（不大于0.4mM ）双氧水处理内皮细胞后，细胞形态没有明显变化； 而当双氧水浓度较高时，细胞形态变化明显，而且细胞调亡率也显著增加。利 用 AFM 对内皮细胞在双氧水处理前后进行力学测量的结果表明，在低浓度下 （不大于0.4mM ），随着双氧水浓度的增加，细胞的弹性会增大，但是当双氧 水浓度超过 0.4mM 后，随着浓度的增加，细胞弹性开始变小。 关键词：原子力显微镜，细胞弹性，氧自由基，力曲线模型 I 中文摘要 ABSTRACT Cancer is one of the most serious diseases that threaten our human beings’ health， Oxygen free radicals （OFR ）plays an important role in the occurrence of cancer. The elasticity of cell not only has influence on its physiological function ， but also reflects its pathological changes. The atomic force microscopy （AFM ） has been an extremely significant tool for biological morphology and mechanics properties of cells， their elastic modulus can be simulated in accordance with relevant theoretical models. In this paper ， several common AFM force-curve models are reviewed; specific calculation method on elasticity of cell is proposed. Moreover ， the elasticity of cancer cell ， as well