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XE-2100血液分析检测原理及临床应用 第二军医大学长海医院实验诊断科 凌 励 细胞分析基本原理 （一）运用半导体激光的流式细胞技术： 在流式通道内，稀释后的血液从样本口低速进入快速运动的鞘液流中，因为两种液体的流速不同，所以不会混合，形成一个直径30微米的液流，同时加入不同的溶血素和缓冲液和荧光染料聚次甲基和噁嗪。当细胞单个排列通过激光束时，收集前向散射光、侧向散射光和侧向荧光的信号，进行细胞分析。 1. 前向散射光：反映细胞大小。 2. 侧向散射光：反映细胞的内容物如核和颗粒。 3. 侧向荧光：反映细胞内DNA、RNA的含量。 （二）阻抗与射频联合检测技术： 检测小孔的内外电极上存在直流电和射频两个发射器，细胞经过测试区时，接受直流电和射频两种电流检测。直流电测细胞整体大小，射频探测核的结构。产生电脉冲信号将同一细胞定位于二维的散射图中。 1.电阻抗（DC）：反映血细胞的体积大小。 2.射频（RF）：反映血细胞内的密度，（细胞核的大小等其他信息）。 二.白细胞分类原理 （一）白细胞4分类通道(DIFF channel) 溶血素作用原理 在“DIFF”通道 特殊的溶血素(STROMATOLLYSER-4DL)将红细胞破坏,正常情况下白细胞分为除嗜碱性粒细胞外的中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞。当出现异常细胞时,由于各类细胞的核型不同，胞浆内DNA、RNA的含量不同,因此在分类散点图所占的位置就不同。纵座标（Y轴）表示侧向荧光强度，反映亚甲基染料对DNA/RNA的染色强度，横座标（X轴）表示侧向散射光强度，反映细胞的内容物。 (二)白细胞计数和嗜碱性细胞通道( WBC/BASO channel) 用于检测嗜碱性粒细胞及计数白细胞。在特殊溶血素(STROMATOLLYSER-FB)的作用下,红细胞和血小板破碎，除嗜碱性细胞外的其他白细胞变成裸核。这样裸核数加上嗜碱性细胞数即为白细胞总数。Y轴表示前向散射光，反映细胞体积，X轴表示侧向散射光[2]。 嗜碱性细胞细胞溶血素作用示意图 （三）幼稚粒细胞通道(Immature Myeloid information, IMI channel) 在“IMI”通道内，该仪器利用成熟粒细胞膜表面含较多量的脂质及较少量的蛋白质而幼稚粒细胞膜表面则相反的原理，检测时加入含聚乙二醇次乙基团和硫化氨基酸的表面活性剂以破坏细胞膜，导致成熟粒细胞膜破坏而幼稚粒细胞膜部分受损，从而使聚乙二醇次乙基团和硫化氨基酸进入幼稚粒细胞与细胞膜和细胞内容物结合，不同的幼稚粒细胞对试剂的作用有所不同；再用直流电法测量细胞的大小，而射频则透入细胞内，测量细胞核的大小及核与胞浆的密度，因而在以射频信号为纵轴，直流电信号为横轴的“IMI”散射图上，不同细胞体积和核的密度及大小的细胞占据的位置不同。RF测细胞核的大小及密度为Y轴，DC测细胞体积和数量为X轴。 (四)白细胞分类报警系统 仪器为每个可疑警号（Q-flag）设置一个直方图来表达“Yes/No”可疑警号，仪器将临界值设在100，若参数的可疑警号值低于100则定义为阴性，若在100与300（最大值）之间则定义为阳性，可疑警号的数值反映了可疑警号的可信度。可疑警号的类型及含义见附表。 表1. 可疑警号的类型及含义 类 型 含 义 WBC-A-S? 白细胞散射图异常? Blasts? 出现原始粒细胞? Imm Gran? 出现早幼粒、中幼粒、晚幼粒细胞? Left Shift? 出现中性杆状核细胞? Atypical Lymph? 出现异形淋巴细胞或浆细胞? Abn Lymph /L- Blasts? 出现淋巴细胞异常或原始淋巴细胞增多? （五）临床应用 1. 正常的白细胞散点图 2.淋巴细胞增多 3. 中性粒细胞增多， 4.嗜酸性细胞增多 5. 单核细胞增多，伴幼稚粒细胞出现 6. 嗜碱性细胞增多 7. 原始细胞出现（1） 8. 原始细胞出现（2） 9. 原始细胞和幼稚粒细胞同时出现，嗜酸、嗜碱性细胞增多 10. 原始淋巴细胞出现（1） 11. 原始淋巴细胞出现（2） 三．网织红细胞检测 检测原理 XE－2100使用RET-SEARCH Ⅱ试剂进行网织红细胞和PLT-O的计数。RET-SEARCH Ⅱ试剂包括稀释液和染液。稀释液中的表面活性剂使红细胞、白细胞的体积膨胀，同时使细胞膜轻微受损，便以染液进入细胞内。当染液进入细胞内后，其中的荧光染料聚次甲基即对细胞浆内的DNA、RNA进行染色。成熟红细胞和网织红细胞因细胞浆内的RNA含量不同而被区分，网织红细胞与白细胞因细胞浆内的DNA和RN