九孔鲍非特异性免疫研究.pdf

独创性声明 本人声明，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教师的指导下独立完成 的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答 谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做 出贡献的同志，都在论文巾作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识 产权的行为，由本人承担应有的责任。 学位(毕业)论文作者亲笔签名：糊弘苦炎 日期：另一彩、s、；／ 论文使用授权的说明 本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定，即学 校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅：学校可以公布论文的全部或 部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 保密，在 年后解密可适用本授权书。 口 不保密，本论文属于不保密。 口 学位(毕业)论文作者亲笔签名：摘跳数 日期：≯。。，、文§J 指导教师亲笔签名： 易寿彩 日期．--埘t,6，j^．每f 塥建农林大学硕l‘学位论立 摘要 近年来养殖贝类的病害日趋严重，已成为贝类养殖业发展的瓶颈问题。贝类 的免疫系统在防御疾病中扮演着极其重要的角色。本实验研究了鲍鱼非特异性免 疫产生机制，为贝类的免疫学研究提供理论依据。 通过光镜、扫描电镜和透射电镜的观察对九孔鲍的血细胞的形态、表面结构 及超微结构进行了研究。根据细胞的大小、形态结构可以将血细胞分为四种类型： I型大透明细胞，圆形或椭圆形，大小约为11．8№×9．52ram，细胞核约占总细胞 的～半以上，为6．2×6．5I．tm；1I型小透明细胞，细胞圆形者居多，也有梭形、松 果形，大小6．529mX6．2l¨m，细胞核染成蓝色或紫红色。III型大颗粒细胞，细 胞大小约为6．25×7．48I-tm，有圆形、梨形、松果形，细胞核染成蓝色或紫红色； 6¨m，细胞核为蓝色 Ⅳ小颗粒细胞，是最小的一种细胞，细胞大小为4．8帅×5 者居多。透射电镜观察结果表明血细胞主要归属两大类型：I型透明细胞和II型 颗粒细胞。I型透明细胞电子密度较低，。II型颗粒细胞的电子密度较高。 研究鲍鱼血清中凝集素的凝集特性发现，鲍鱼血清能凝集包括人A、B、0型 血细胞、兔、牛、大鼠、小鼠、鸡、番鸭和鹌鹑等多种动物的红细胞。血清中的 凝集素具有一定的热稳定性和较好的PH稳定性。65℃处理30min，血清中的凝 集素还具有凝集鸡红细胞的能力；在PH达12时，凝集索还具有凝集鸡红细胞的 能力。血清中的凝集素能被D一果糖、D一甘露糖、D一木糖、麦芽糖所抑制。凝集 素能凝集小球藻、扁藻、日本扁藻。凝集素还具有凝集枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、 鳗弧菌、嗜水气单胞菌的能力，但不能凝集巴氏杆菌、沙门氏菌。注射鳗弧菌刺 激后能提高凝集素对鸡红细胞的凝集效价。 投喂或注射葡聚糖、维生素C、嗜水气单胞菌一天后，鲍血清和肝脏中的 碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、过氧化氢酶的活性水平均有所提高，其中血清中碱性 磷酸酶活性分别比对照组高46．7％，0．58％，29．2％，酸性磷酸酶分别比对照组 ％和17．1％；ACP活性分别比对照组高42．0％，2．00％和24．6％。注射嗜水气单 胞菌后，鲍肝脏中CAT活性为72670KUl；血清中CAT活性为8043kuL。鲍鱼经 嗜水气单胞菌诱导后，碱性磷酸酶、酸性磷酸酶均能维持在较高的水平。肝脏中 酶的活性比血清中的酶的活性高 实验中发现鲍经过嗜水气单胞菌诱导后，血清中的抗菌活性因子明显高于未 诱导的。抗菌活性测定结果显示，诱导后血清中的这种抗菌活性因子对枯草杆菌、 短小芽孢杆菌、嗜水气单胞菌、沙门氏菌、大肠杆菌有明显的抑制作用。诱导血 以下有比较明显的差异条带，诱导后的鲍鱼血清中含量多于未诱导的，由此推测 祸建农林人学倾1一学位论文 其为抗菌的多肽。对诱导后的鲍血清尝试使用进行CM阳离子交换柱层析分离纯 化，得到6个主要吸收峰，抗菌活性测定结果显示