慢性乙型肝炎组织病理学指标及病毒X基因变异与患者预后相关性研究.pdfVIP

中史摘垂 慢性乙型肝炎组织病理学指标及病毒x基因变异与患者预 后的相关性研究 ● 中文摘要 前言 掘统计，在全世界的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者中，我国约占一半。 对慢性乙型肝炎的基础研究和临床诊疗一直是我国重点。以往对HBV的研究主 要集中在血清学方面，由于HBV在血清和肝组织中其病毒状态、抗原的含量、 血清型和基因型、病变程度等方面均存在显著差异，难以直观地反应病变的状态 和严重程度，所以肝活体组织检查越来越成为必要手段，在诊断潜在病变和早期 ● 纤维化，最终诊断或除外HBV感染方面有着不可替代的作用。目前，肝穿刺活 检已相当普遍，但对肝穿刺结果的判定、各项检测指标之问的相互关系及和预后 的联系，还缺乏系统性评估。 随着分子生物学技术的发展，病毒变异在HBV致病与致癌中的作用越来越 引起关注，特别是x基因及其蛋白。x基因是HBV基因组内功能重叠最明显的 区域，其编码的X蛋白具有广泛的反式激活作用，目前被认为是研究HBV致病 与致癌作用机制的突破口。以往对x基因及蛋白变异的研究多采用血清标本或 在体外细胞水平进行，与体内肝细胞中的实际情况有一定差距。肝组织内x基 因的变异与各组织病理学指标之间的关系以及对疾病转归的影响还未见报道。 ■ 近年来，在对肝细胞癌发生机制的研究中，抑癌基因启动子的高甲基化越来 越引起人们的关注。虽然许多研究证实，肝细胞癌中p161NK4“的高甲基化可被普 遍检出，且HBV感染能显著增加肝组织p16小K4“甲基化比率，从而使p16蛋白 低表达或不表达，在肝细胞癌形成早期起了重要作用，但其中的机制并不明确。 最新体外研究提示，HBV的病毒蛋白和病毒变异可能与此过程有关，但在人体 条件下这种相关性是否存在，结果也有待进一步证实。 本研究一方面以较大临床肝穿刺样本作为研究对象，通过对慢性乙型肝炎组 内HBVDNA含量)和X基因变异的回顾性研究，明确它们之间的相互关系及 与患者预后的联系，找到可用于肝穿刺活检的病理辅助诊断指标，对慢性乙型肝 ● 炎患者的预后加以评估及指导临床诊疗；另一方面在组织水平研究了HBV病毒 中文摘叠 之间的关系，为HBV介导的肝细胞癌形成机理的研究提供新方向。 ■ 第一部分HBV相关组织病理学指标和慢性乙型肝炎患者预后的相关性研究 目的：通过对慢性乙型肝炎肝穿刺标本中组织病理学指标和患者预后的回顾性研 究，明确各指标间的相互关系及和患者预后的联系。 方法：对216例肝穿刺活检病例进行预后随访，时间为2～18年。根据随访结果， 按有无肝细胞癌的发生首先将患者分为两组：癌变组和非癌变组；非癌变组患者 又按有无肝硬化的发生分为硬化组和非硬化组；最后非硬化组患者按血清谷丙转 评分来表示；免疫组化En 和HBx蛋白的表达；荧光实时定量PCR检测单位肝组织内HBVDNA的含量。 ● 结果：相关分析结果显示：肝组织内HBeAg的表达与慢性肝炎炎症分级(G分 化分期(S分期)(P=-0．002)均呈显著正相关。部分指标预后组间也存在差异： 硬化组G分级显著高于非硬化组(尸=O．000)，ALT波动组显著高于ALT正常组 (P=O．024)的表达在硬化组明显比非硬化组高。方差分析结果还显示HBeAg和 HBx蛋白的表达对预后的影响具有协同作用：同一病例中两者肝组