高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒SHxx132013株的分离与鉴定.pdfVIP

中国动物传染病学报 2014,22(2): 32-38 Chinese Journal of Animal Infectious Diseases ·研究论文· 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 SHxx13/2013 株 的分离与鉴定 程 群，姜一峰，虞凌雪，王 康，杨 莘，李丽薇，高 飞，于 海，童 武，童光志，周艳君 （中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241 ） 摘 要：2013 年初上海某猪场保育猪群中出现高热、呼吸障碍等临床表现，导致大部分发病猪死亡，为了确定此次猪群中爆发 疫病的病原，本研究从发病猪群中随机采集了15 份血液样品，利用RT-PCR 方法对本次疫病病原进行了检测。结果显示，有 11 份临床样品呈现猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV ）强阳性，且与高致病 性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highly pathogenic Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, HP-PRRSV ）对照大小相一致。 随后从阳性样品中选取SHxx13/2013 在Marc-145 细胞中进行病毒的分离与鉴定，结果显示SHxx13/2013 在细胞接种后第 1 代 即出现明显的细胞效应（cytopathic effect, CPE ），其病变特征与高致病性PRRSV 强毒HuN4 株一致。对SHxx13/2013 第5 代 细胞分离毒进行RT-PCR 和IFA 等特异性鉴定，结果显示该毒株为PRRSV 分离株，其蚀斑形态和生长特性与强毒HuN4 株相似。 分段克隆该毒株全长基因进行测序和序列分析，结果显示，新分离的流行毒SHxx13/2013 株全长基因组为 15 319 bp，其Nsp2 基因特征与HP-PRRSV 一致，在第482 位和第534~562 位发生两处共30 个氨基酸的不连续缺失，且该毒株与高致病性PRRSV 代表毒株HuN4 亲缘关系较近，全长基因的核苷酸同源性为99.6%。本研究结果表明新分离的SHxx13/2013 株属于高致病性 PRRSV 分离株，据此我们推测今年年初上海某猪场爆发的疫情主要是由HP-PRRSV 感染所致。 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒；PCR ；分离；鉴定 中图分类号：S852.659.6 文献标志码：A 文章编号：1674-6422 （2014 ）02-0032-07 CHARACTERIZATION OF RECENTLY ISOLATED SHXX13/2013 STRAIN OF HGHLY PATHOGENIC PORCINE REPRODUCTIVE AND RESPIRATORY SYNDROME VIRUS CHENG Qun, JIANG Yi-feng, YU Ling-xue, WANG Kang, YANG Shen, LI Li-wei, GAO Fei, YU Hai, TONG Wu, TONG Guang-zhi, ZHOU Yan-jun (Shanghai Veterinary Research Institute, CAAS, Shanghai 200241, China) Abstract: In early 2013, an acute disease characterized by high fever and respiratory problems in piglets outbroke on a pig farm in Shanghai and caused many deaths. To investigate the causative agent, a total of 15 serum samples were collected and viruses were examined in RT-PCR. Eleven out of of 15 clinical samples showed strong Porcine reproductire a