中国葡萄属植物野生种抗白粉病基因克隆研究.pdfVIP

农业技术 中国葡萄属植物野生种抗白粉病基因克隆研究 由西北农林科技大学博士生导师王跃进教授主持完成的国家转基因植物研究与产业化开发 专项“中国葡萄属植物野生种抗白粉病基因克隆”研究项目，经过 6 年的探索研究，2006 年 12 月 30 日在陕西杨凌通过教育部组织的科技成果鉴定。 中国是世界葡萄属植物最重要 的原产地之一，拥有丰富多样的野生葡萄资源。这些资源不仅丰产性好，与欧洲葡萄杂交易 亲和，而且不携带美洲葡萄的“狐臭味”，对主要真菌病害具有极强的抗性，是重要的抗病 基因资源。为了利用中国野生葡萄的抗病基因并通过转基因技术培育抗病优质葡萄新品种， 王跃进率领的科研项目组首次采用 mRNA 差异显示技术，从高抗葡萄白粉病的中国葡萄属 野生种华东葡萄白河-35-1 中获得抗白粉病相关基因cDNA 片段 20 个，采用抗病基因同源序 列的方法获得抗病相关基因 cDNA 片段 7 个。首次从中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1 中克隆了抗白粉病芪合成酶基因家族成员 6 个，乙二醛氧化酶基因 1 个，抗坏血酸过氧化物 酶基因 1 个，醛脱氢酶基因家族成员 3 个，病程相关蛋白基因 1 个，几丁质酶基因家族成员 2 个，共计 14 个基因。科研人员对这些基因进行了体外表达研究，分离纯化了基因的表达 产物，制备了多克隆抗体。构建了抗白粉病相关基因表达载体，采用农杆菌介导的方法，对 欧洲葡萄无核白、底来特和爱莫无核的叶片，以及爱莫无核胚珠诱导的胚性愈伤组织和胚状 体进行了遗传转化，获得转基因葡萄植株 56 株。构建了中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1 抗白粉病基因 cDNA 文库，获得抗白粉病基因相关 ESTs 序列 145 个，其中抗白粉病相关基 因cDNA 全长序列 17 个，并首次发现抗白粉病相关新基因 5 个，首次获得中国葡萄属野生 种抗病候选基因 cDNA 片段 47 个。西北农林科技大学此次所获得的中国葡萄属野生种抗白 粉病相关基因和中国葡萄属野生种抗病候选基因 DNA 片段 47 个，抗白粉病基因相关 ESTs 序列 145 个，不仅具有重要的理论价值，而且对于我国乃至世界葡萄的发展具有重要的实践 意义，同时对获得具有我国自主知识产权的新品种具有很重要的意义。 来源：/