人脐带间充质干细胞的体外分离培养及诱导分化.pdfVIP

( ) Jou rnal of Zhengzhou U n iversity M edical Science s 　M ar. 　20 10　Vol. 45　No. 2 ·2 13 · 人脐带间充质干细胞的体外分离 、培养及诱导分化 肖宏涛 1) ,牛希华 1) ,刘 　毅2) # ) ) 1 郑州市第一人民医院河南省烧伤诊治网络中心 郑州 450004　2 兰州军区兰州总医院烧伤整形科 兰州 730050 #通讯作者 ,男 , 1964年生 ,博士 ,教授 ,主任医师 ,研究方向:脂肪组织工程 , Em ail: L iuzh i yahoo. com. cn 　　关键词 　脐带间充质干细胞 ;分离 ;培养 ;诱导分化 ;体外 　　中图分类号 　Q813. 1 ( ) 　　摘要 　目的:体外分离 、纯化及培养人脐带间充质干细胞 M SC s ,并观察其生物学特性 。方法 :将剔除动静脉 的新鲜人脐带组织切成小块培养 ,得到贴壁细胞 ,倒置显微镜观察细胞形态 ,绘制第 1、5及 10代细胞生长曲线 ;流 ( ) ( ) 式细胞仪测定细胞表面标记 CD 13、CD44、CD 14、CD34 与 HLA DR ;化学染色 油红 O、茜素红染色 及 R TPCR 检 测其体外诱导成脂和成骨分化的能力 ; R TPCR 检测胚胎干细胞特异性标志基因 OCT4。结果 :体外培养 4 ～6 d 后 ,有细胞从组织块中游出; 细胞传代培养达 10 代后无明显的形态和增殖能力改变 。培养细胞表达 CD 13 与 CD44 , 但 CD 14、CD34及 HLA DR 呈阴性表达 。体外诱导实验证实 ,该细胞具有成脂和成骨分化的能力 。R TPCR 显示其表达 OCT4基因。结论 :人脐带 M SC s能在体外培养 、扩增并且具有和骨髓 M SC s类似的生物学特性 ,可作 为组织工程种子细胞来源 。 Isolation , culturation, and induced differentiation of human umbilical cord mesenchymal stem cells in vitro 1) 1) 2) X IA O H ong tao , N IU X ihua , L IU Yi 1) B u rn D iag nos is and Trea tm en t N etw ork Cen ter in H enan P rovince, the F irs t P eop le ’s H osp ita l of Z heng zhou, Z hengzhou 450004 　2) D ep a rtm en t of B u rn and P las tic S u rg ery, L anzhou Genera l H osp ita l, L anzhou Comm and of PLA , L anzhou 730050 　　Key word s　um b ilical cord m esenchym al stem cell; isolation; cu lturation; induced