紫杉醇长效PLGA微球的制备、性质及其在体内抗H22型肝癌的疗效.pdfVIP

紫杉醇长效PLGA微球的制备、性质及其在体内抗H22型肝癌的疗效 吕 伟 裴 瑾 王 斓1 张海锋柳怀玉2 韩 冰 (吉林大学药学院生物药学系，吉林 长春 130021) (摘要]目的制备长效紫杉醇聚乳酸一羟基乙酸共聚物(PLGA)微球，对微球的常规理化特性、体外释放特性进行考察并对该微球的抗肝癌 疗效进行鼠体内评估。方法采用单乳溶剂挥发法制备紫杉醇PLGA微球成功后利用激光粒度分析仪测定其平均粒径，利用扫描电镜观测微球表 面形貌，对3批微球样品进行载药量及体外释放检测，构建小鼠1-122肝癌模型，以瘤内方式给药，给药15d后观测肿瘤病理切片，评估疗效。结果 微球表观平整，形态圆滑，平均粒径为36．4仙肛，3批样品平均载药量为7．42％，可维持30d左右的体外释放，体内实验显示微球具备良好抗H22型 肝癌疗效。结论所制备的紫杉醇PLGA缓释微球具备良好的理化特性、体外释放特点并具备良好的抗肿瘤疗效。 (关键词]紫杉醇；PLGA；微球；H22型肝癌 [中围分类号)R735．7[文献标识码)A [文章编号]1005-9202(2011)12-2284-02 紫杉醇是从植物紫杉中提取的一种化合物，是近些年来发 1．3 微球的表面形貌观测及粒径测定取一定量的微球样品 现的一种高效抗肿瘤药物…，其高效的抗肿瘤特性已在包括卵 经过包埋并进行镀金处理后利用扫描电镜进行表面形貌的观 巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌等肿瘤的治疗方面得到了验 测。利用激光粒度分析仪对微球的粒径进行测定。 证心“J。作为细胞微观的特异性稳定剂，紫杉醇可促进微管蛋 1．4 ml 微球的载药量测定取5mg微球样品，将之置于10 白聚合，抑制解聚，从而抑制细胞的有丝分裂，使肿瘤细胞周期 离心管底部，向其中加入2ml二氯甲烷溶液，静置2min，将微 中止，由此起到抗肿瘤功效¨1。有研究将紫杉醇用于肝癌治 ml 球溶解后加入5 50％的乙腈溶液，涡旋振荡处理，通入氮气 疗，发现紫杉醇可影响肝癌细胞的细胞外信号转导，从而引起 挥发二氯甲烷，之后利用高效液相对紫杉醇进行检测，利用上 细胞凋亡，并且可抑制肝肿瘤组织血管形成及肝癌细胞转 述方法对3批制备得到的微球分别进行载药量测定。 移¨J。对紫杉醇进行剂型改造，保护药物，延长其体内存留时 1．5微球的体外释放检测取20mg微球样品，置于10ml离 间是近年来研究热点。本研究在紫杉醇具备良好的抗肝癌疗 ml 心管底部，加入5 pH7．0PBS缓冲液，封口膜封口，将离心管 效的基础上，进一步将其制备成了紫杉醇PLGA缓释微球剂置于37℃的摇床中，120r／min进行摇动，固定时间点离心，取 型，延长了紫杉醇发挥抗肿瘤作用的时间，提高其生物利用度。 出4ml上清液，其中20ml用于液相检测，其余弃掉，同时向离 对制备得到的微球进行了表观形貌、粒径、载药量、体外释放等 心管中补充4ml新鲜PBS缓冲液，使释放继续进行。每到相 特性的分析，并以I-122肝癌模型小鼠为实验对象研究了紫杉醇应检测时间点重复上述检测。共对3批制备得到的微球样品 微球的动物体内抗肿瘤药效。 进行体外释放检测，绘制3批样品的平均释放曲线。 1．6 微球抗肝癌疗效试验 利用H22腹水型肝癌小鼠的腹 1材料与方法 水，对昆明小鼠进行腹腔接种，连续接种5代，得到稳定的I-122 1．1 材料紫杉醇购于Sigma公司；PLGA购于美国Lakeshore 肝癌腹水瘤小鼠后再次抽取其腹水，细胞计数，调整肿瘤细胞 公司；二氯甲烷、乙腈等常规试剂购于北京化工；BSl24S型电浓度至5×106ml～，接种于昆明小鼠前肢足垫，待肿瘤体积增 子天平(德国Sar