第章病毒感染的检查方法与防治原则-.pptVIP

病毒感染的诊断和防治吉林大学基础医学院黄 红兰 教授 一、标本的采集与送检 原则基本与细菌相似，但应注意： 1.标本用“双抗”或两性霉素B处理 2.低温保存，尽快送检 3.血清学诊断---双份血清 二、病毒的分离与鉴定 （一）病毒的分离 动物接种（animal inoculation） 鸡胚培养（egg inoculation） 细胞培养（cell culture） 应用：尚无敏感细胞的病毒培养 动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等 优点：结果易观察，可建立动物模型 缺点：有饲养条件要求，费用高，动物 体内常带有潜伏病毒 2.鸡胚培养 采用孵化9～14天的鸡胚 绒毛尿囊膜（allantocherion） 痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔（allantoic cavity） 接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔（amniotic cavity） 流感病毒的初次分离 卵黄囊（yolk sac） 嗜神经病毒 3.细胞培养 单层细胞培养（monolayer cell culture） 分类 悬浮细胞培养（suspended cell culture） 原代细胞（primary cell） 细胞种类 二倍体细胞（diploid cell） 传代细胞系（continuous cell line） 病毒的细胞培养 特点：①对多种病毒敏感 ②生长能力有限, 获取成本高 ③可携带潜伏病毒 病毒在培养细胞增殖的指征 (1)细胞的变化 ①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等 (多数病毒)； ②形成多核巨细胞或称融合细胞 (麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等) ③在培养细胞中形成包涵体 (狂犬病病毒、麻疹病毒等) (4)细胞代谢改变 细胞代谢变化 pH值改变 1.形态学鉴定 电子显微镜：设备、操作复杂，应用受限。 光学显微镜：可见大病毒（痘类病毒）， 对一般病毒检测意义不大。 三、病毒感染的血清学诊断 应用： ①采取标本分离病毒为时已晚； ②目前尚无分离此病毒的方法或难以分离的病毒； ③为证实所分离的病毒的临床意义； ④进行血清流行病学调查。 1.中和试验（neutralizing test） 病毒＋中和抗体 病毒失去感染性 特点：特异性高，抗体维持时间长 应用：人群免疫情况的调查，临床诊断少用。 2.补体结合试验 （complement fixation test） 用已知病毒可溶性补体抗原检测病人血清中相应的补体抗体。 特点：特异性低，抗体出现早，消失快 应用：近期感染指标 四、病毒感染的快速诊断 数小时内出结果 病毒颗粒 病毒成分（抗原或核酸） 早期抗体检测（IgM） （一）形态学检查 电镜和免疫电镜检查  普通光学显微镜检查（二）病毒蛋白抗原检查 免疫标记技术 （三）特异性IgM抗体的检测  孕妇感染风疹病毒 EBV早期抗原抗体 （四）检测病毒核酸 第二节 病毒感染的预防 一、人工主动免疫 活疫苗（living vaccine） 死疫苗（killed vaccine） 灭活全病毒疫苗 亚单位疫苗 合成肽病毒疫苗 基因工程疫苗 DNA疫苗 新型多价联合疫苗 二、人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白 血清丙种球蛋白 细胞免疫制剂 IFN-α、β、γ 细胞因子 IL-2、IL-6、IL-12 TNF 、CSF 淋巴因子激活的杀伤细胞---LAK细胞 思考题 1.分离病毒的方法有几种？ 2.病毒在组织细胞中增殖的指标是什么？ 3.病毒性感染的快速诊断方法有哪些？ virus 3.血凝抑制试验（