浙科版选修1第一部分《实验二 微生物的培养和利用》word学案3.docVIP

分离以尿素为氮源的微生物【实验原理】⑴利用选择培养基筛选尿素分解菌选择培养基：将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基叫选择培养基。不同微生物利用氮源种类不同。脲或称尿素，是蛋白质降解的产物。人和其他哺乳动物的尿中都含有尿素，大量的尿素存在对环境造成污染。有一些细菌含有脲酶，通过降解尿素作为其生长的氮源。这类细菌对于自然界中的氮素循环具有重要的意义。酚红作为酸碱指示剂被添加到了培养基中，其变色范围是pH6.4～8.2，在酸性情况下呈黄色，碱性情况下呈红色。以尿素为氮源的微生物培养一段时间后，由于细菌产生的脲酶向周围扩散，将培养基中的尿素分解，产生的NH3使培养基的pH由原来的中性变为碱性，于是培养基中的酚红由黄色变成红色，圆形红色区域愈大，表明这种菌利用尿素的能力愈强。用液体稀释涂布法测定菌体数量，分离菌种【土样的获得】在有哺乳动物排泄物的地方取得【实验步骤】 【问题思考】⑴ 因为尿素在高温条件下容易分解，所以本实验中，采用了_________方法除去尿素溶液中的微生物。⑵ 本实验中利用_________的 _________培养基，采用了_____________进行分离和记数尿素分解菌。⑶ 预测本实验的结果是：LB全营养固体培养基上的菌落_______；尿素固体培养基上的菌落________，　 　　 一定时间内，菌落周围出现________区域。用浓度为10-4和土壤10-5土壤稀释液接种，更容易形成单菌落的是________________。【解析】⑴ 过滤 ⑵ 不含其他氮源 选择 液体稀释涂布法⑶多而杂 少而纯 红色区域 10-5土壤稀释液【练习题】1．若要分离土壤中的尿素分解菌，对于采集和处理土壤样品，下列表述不正确的是A．最好选择在肥沃湿润、动物排泄物多的土壤中取样B．采集的土样需经高温灭菌后，才可以用于制取土壤稀释液C．制备土壤稀释液时，要用无菌水D．用于制备土壤稀释液的各种器具要经过灭菌2．下列表述正确的是A．只有细菌可以分解尿素B．在尿素作为唯一氮源的培养基上，只有一种微生物可以生长C．土壤中尿素分解菌的存在有利于植物的N素营养D．若要分离出土壤中能独力固氮的微生物，可用尿素培养基3．工作人员为了解某种细菌的发酵进程，连续取样检测培养液中的细菌数目。已知开始时细菌的数量约为2×104个／mL。工作人员在培养的不同时间进行4次连续取样，分别进行如下稀释处理，再分别取第一次取样稀释103倍、第二次取样稀释105倍、第三次取样稀释106倍、第四次取样稀释106倍的菌液1mL，接种于装有已灭菌的培养基的①、②、③、④号培养皿中培养48小时，检查其菌落数目。 菌液　　 9mL水　　 9mL水　　9mL水　　9mL水　　9mL水　　9mL水 图1　　对不同时间取样的菌液分别进行稀释(数据表示稀释倍数)图2　　对不同时间取样的稀释菌液进行培养 得到如下结果：①、②、③、④培养皿中的菌落数分别是19个、25个、46个、47个。请根据以上资料回答下列问题：⑴ 接种细菌培养液于平板上的方法为__________。四次取样测得的培养液中实际的菌体数分别是每毫升________、_______、　_______、_________个。⑵ 用该种方法测得的细菌数量是＿＿＿＿＿＿（活或死）菌的数目，原因是_________________。【练习题解析】1.B 2.C 3.⑴ 液体涂布法 1.9×104、2.5×106、4.6×107、4.7×107 ⑵　活 ，活菌能够通过繁殖形成菌落 精品资料，你值得拥有！