Notch信号通路相关基因在儿童急性髓系白血病中的表达及意义.pdf

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Notch信号通路相关基因在儿童急性 髓系白血病中的表达及意义 张建华,杨成胜,岳绍中,可秋萍,娄莹 (新乡市中心医院,河南新乡453000) 摘要:目的探讨Notch信号通路中相关基因在儿童急性髓系白血病(AML)中的表达及意义。方法采用实 651.2±821.5 gedt、Jagged2、Deha4的表达水平。结果AML组和对照组骨髓中受体Notchl的表达水平分别为9 和327.1±135.7,配体Jagged2的表达水平分别为5 16 比较均无统计学意义(P均0.05)。结论儿童AML的发病与Notch信号通路中相关基因的突变或异常表达有 关。 关键词:白血病,粒细胞,急性;Notch信号通路;骨髓 doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2013.05.032 中图分类号:R733.71文献标志码:B 文章编号:1002-266X(2013)05-0083-03 3 mL 急性髓系白血病(AML)是儿童造血组织的恶min,4℃750r/min离心3min;弃上清液加2 r/min 性增殖性疾病,白细胞在生长、分化和发育的一定阶 红细胞裂解液,混匀后至冰上1rain,4℃750 mL 段发生恶性变,使其丧失正常的功能,导致恶性克隆 离心3min;弃上清液加1 Trizol液,用移液器吹 性病变无节制的增殖,全身器官、组织广泛浸润,破 打使红细胞充分裂解,常温静置5min,置于一80℃ 坏其正常的结构和功能,最终导致机体器官衰竭。 保存,用于RNA制备。②RNA的提取及纯度和浓 近年来,随着化疗、造血干细胞移植和支持疗法的不 度的测定:用Trizol试剂提取细胞总RNA;提取4 断改进,儿童白血病的临床疗效大为改善,但鉴于儿 txLRNA,加入DEPC液至1mL,在用DEPC水校正 童白血病在免疫学分型、治疗上与成人有较大的差 过的紫外分光光度仪上进行测定。在波长为260 别,其对治愈率及其预后均提出更高的要求。2010nm和280 年5月~2011年9月,我们检测了Notch信号通路值,通过两者的比值(OD:∞值/OD:。。值)计算RNA 中相关分子Notehl、Notch2、Jaggedl、Jagged2、Deha4的纯度。总RNA样品含量的计算:在260nm波长 OD=40 在儿童AML中的表达情况,探讨了Notch信号通路的紫外线下,1 tLg/mLRNA。RNA样品浓 相关分子在儿童AML发病中的作用,为白血病的靶 向治疗提供实验依据。现报告如下。 000。样本总RNAOD:∞值/OD:帅值的比值范围在 1资料与方法 1.8~2.0。如果比值太小,说明样品中残存的蛋白 1.1 临床资料选择我院初诊的AML患儿20例质或者其他杂质含量较多,则需要重新应用酚/氯仿 (AML组),男13例、女7例,年龄2一13岁、中位年提取。③cDNA链的合成:逆转录反应体系20曲, 龄7.8岁。同期选择我院完全缓解的AML患儿20包括总RNA 2恤L,Oligo(dT)181IxL,DEPC水9 例(对照组),男10例、女10例,年龄1~13岁、中位 斗L,混匀后65℃5min,冰浴1rain后加入5×reac— ti

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