原创力文档- 1、本文档共7页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
微生物学通报 JUN 20, 2011, 38(6): 853−859
Microbiology China © 2011 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@
研究报告
绿僵菌微循环产孢基因 Pyk 的克隆及
RNA 干扰分析
徐飞 彭国雄 夏玉先*
(重庆大学生物工程学院基因工程研究中心 重庆市杀虫真菌农药工程研究中心 重庆 400030)
摘 要: 微循环产孢是真菌遭遇逆境时发生的一种产孢机制, 具有繁殖快速及抗逆性强等诸多优
点。研究绿僵菌的微循环产孢机制并加以利用, 对增强该菌在生物防治中的应用效果具有重要的
意义。采用绿僵菌基因组数据库与 NCBI 数据库中同源蛋白比对获得 Pyk 基因 DNA 序列; 分析
Pyk 基因结构并设计引物, 通过RT-PCR 扩增克隆Pyk 全长cDNA 序列。序列分析显示该基因cDNA
全长 1 934 bp, 开放阅读框长为 1 752 bp (GenBank 登录号: HQ153828), 编码产物为583 个氨基酸
的丙酮酸激酶, 该酶与子囊菌门中其他真菌具有较高的相似性(57%−77%) 。构建Pyk 基因的RNAi
载体, 基因枪转化野生型绿僵菌获得3 个突变菌株, RT-PCR 证实3 个干扰突变菌株中Pyk 基因的
干扰效率分别为: 51%、56% 、33% 。对突变菌株的微循环产孢模式做了进一步分析, 结果显示: 与
野生菌株相比, 突变菌株产生更多的孢子形态类型, 菌落周边的白色菌丝也相对较少。
关键词: 虫生真菌, 微循环产孢, 丙酮酸激酶, RNA 干扰
Cloning and analysis by RNAi of a pyruvate kinase gene
expressed during microcycle conidiation in
Metarhizium ansopliae
*
XU Fei PENG Guo-Xiong XIA Yu-Xian
(Genetic Engineering Research Center of Bioengineering college, Chongqing University, Chongqing Engineering Research
Center for Fungal Insecticides, Chongqing 400030, China)
Abstract: Microcycle conidiation has been proposed as an advantageous conidiation pattern for fungus
with rapid propagation and strong resistance to stress factors. Deeply understand the microcycle co-
nidiation mec
文档评论（0）