应用腺病毒载体系统将HBVC全基因组转导入HepG2细胞地方法学研究.pdfVIP

· 1764 · 南方医科大学学报 (JSouthMedUniv)2008;28(10) 应用腺病毒载体系统将 全基因组转导入 细胞的方法学研究 HBV/C HepG2 1 1 2 1 1 1 1 ， ， ， ， ， ， ； 周彬梁敏锋李伟东王程王战会侯金林 南方医科大学南方医院感染内科广东广州 ( 510515 2 韶关市铁路医院检验科广东韶关 ， 512023) 摘要：目的运用腺病毒系统将 全基因组高效地导入肝癌细胞系，为研究 的复制及蛋白表达情况构建技 HBV/C HBV 术平台方法构建 基因型毒株的 拷贝全基因序列运用腺病毒系统 首先将 拷贝 全基 。 HBV/C 1.3 ， （AdEasy ） ， 1.3 HBV 因序列插入到穿梭载体 经测序证实插入序列的正确性后用 酶切线性化重组穿梭质粒转化 pAdTrack ， Pme I ， 感受态细胞，在细菌细胞内发生同源重组，所得重组腺病毒质粒 用 酶切线性化，用脂 Adeasier-1 pAdEasy-HBV/C PacI 质体法转染 细胞来包装重组病毒用适量感染复数的重组腺病毒感染 细胞并对感染细胞上清中的 293 。 HepG2 ， HBV 、 和 分别进行了定量检测。 结果成功运用腺病毒系统将 拷贝 全基因组高效率地导入 DNA HBeAg HBsAg 1.3 HBV 细胞导入的 能够运用自身的复制调控元件进行病毒的复制和蛋白表达结论运用 系统能够简 HepG2 ， HBV 。 AdEasy 便、快速、高效地将 全基因组导入肝癌细胞系，为抗病毒药物的筛选及评价提供了有效的技术平台。 HBV 关键词肝炎病毒乙型腺病毒 系统 ： ， ； ； AdEasy