暖地大叶藓组织培养研究.pdf

论文题目：暖地大叶藓组织培养的研究 学科专业：植物学 学位申请人：陈圆圆 指导教师：郭水良教授 摘 要 暖地大叶藓(Rhodobryum 物，对治疗心血管疾病具有很好的疗效。本论文以暖地大叶藓幼嫩茎尖为外植体， 应用组织培养方法，成功地获得了无菌的暖地大叶藓原丝体和植株，在此基础上， 研究了培养基类型、机械切割、激素、温度、配子体自身的提取液、培养基组成 等对原丝体诱导和生成量的影响，同时比较了组织培养诱导形成的配子体形态、 光合和红外光谱特点。主要成果如下： 1、通过培养基的筛选发现改良Knops培养基适合原丝体的扩展生长而且能 保持两个月不分化出配子体植株，MS培养基更适合原丝体的分支生长，改良的 White培养基中原丝体生长慢同时伴随植株的分化。 2、运用机械切割法和激素诱导法对原丝体的繁殖进行实验，发现机械切割 后原丝体繁殖量在_个月内比未切割直接转接的繁殖量增加一倍：低浓度的 2．4．D能促进茎段上原丝体的发生。 ． 3、培养基的类型和组成对暖地大叶藓原丝体扩繁有显著的影响。改良Knops 培养基的浓度对原丝体生长影响不大，1／10浓度的改良Knops培养基上生长的 原丝体跟全量改良Knops培养基上的原丝体生长无显著差异。改良Knops培养 基组成成分中硼元素对原丝体生长至关重要，甚至比所有微量元素还重要，从原 丝体生长看，不含硼元素的改良Knops培养基上的原丝体比不含微量元素改良 琼脂、pH为6．0．7．0的培养基更适合于暖地大叶藓原丝体的生长。 4、原丝体初始转接量对暖地大叶藓原丝体扩繁也有显著影响，本试验中以 直径0．8cm左右的原丝体团对原丝体的扩繁生长最为有利。 5、实验表明，暖地大叶藓原丝体生长对温度和水分较为敏感，最适温度是 20．22D。植物激素对原丝体生长有较为明显的作用，6-BA能诱导出愈伤组织团， NAA使原丝体变黑，分支生长少但原丝体纵向生长长，含KT的培养基中原丝 ‘ 体一个月后有较多幼芽分化。 6、组织培养条件下形成的暖地大叶藓植株在形态上有一定程度的分化，论 文描述了组培苗的三种类型：大叶项生型、叶片渐小型和小叶长枝型。不同形态 的植株可以从原丝体分化出植株时就有所不同。跟原丝体生长一样，植株分支繁 殖形态发生对温度也比较敏感，最适温度也是20F1．22t-1。 7、实验室条件下测定了暖地大叶藓生长的光合作用指标，发现组培植株比 野生植株有更高的光饱和点，尤其是形态上变异明显的枝长叶小型植株，但光合 同化速率不如野生采集的植株高；暖地大叶藓原丝体的光合同化速率较高，与野 mol 生植株相近。暖地大叶藓的植株在光强大于饱和点后(≥400lam乏Sd)出现 光抑制现象。水分对植株的光合作用起着很大影响，水分丧失较多(VPD10) mol 时光合作用被明显抑制。植株形态的变异有利于植株适应光照较强(≥350u m之$-1)下生长，而且变异植株对水分的保持有更好的优势。光合荧光参数反映 出野生采集的植株叶片具有更高的PSl3的最大光化学量子产量和PSD的潜在活 性，但实际光量子效率和光合电子传递速率在两种生长条件下的植株差别不大。 8、应用红外和紫外光谱扫描技术对野生和组培条件下暖地大叶藓植株进行 光谱比较，发现虽然两者间的波峰位置、数目和波峰高度均存在较大的差异，说 明两者的化学组成和含量可能会存在较大差异。 关键词：暖地大叶藓，组织培养，原丝体，培养基，激素，机械切割，形态，光 合作用，光谱分析 论文类型：应用研究 SUBJECT：Studiedontissuecultureof Rhodobryumgiganteum MAJOR：Botany Chen AUTHOR：Yuanyuan Guo SUPERVISOR：Prof．Shuiliang