RNA转录(Transcription).ppt

第十四章 RNA的合成  Transcription 转录研究的主要问题: RNA聚合酶 转录过程 转录后加工 转录的调控 转录调控是基因表达调控的核心问题。 第一节 DNA指导RNA的合成（转录） RNA链的转录，起始于DNA模板的一个定位 点，并在另一位点终止，此转录区域称为一个转录单位。一个转录单位可以是一个基因（真核），也可以是多个基因（原核）。 基因的转录是有选择性的，细胞不同生长发 育阶段和细胞环境条件的改变，将转录不同的基 因。 转录的起始由DNA上的启动子区控制，DNA 上的终止子控制转录的终止。 一、RNA聚合酶 RNA合成的基本特征 底物（ATP、GTP、CTP、UTP）NTP RNA链生长方向5’ 3’ 不需引物 需DNA模板 图：RNA聚合酶的催化活性 RNA聚合酶结合到DNA双链的特定部位， 二、RNA聚合酶催化的转录过程 1. 起始（initiation） 局部解开双螺旋，第一个核苷酸掺入转录起始 位点，从此开始RNA链的延伸。 在新合成的RNA链的5’末端，通常为带有三 个磷酸基团的鸟苷或腺苷（pppG或pppA）， 即合成的第一个底物是GTP或ATP。 启动子：RNA聚合酶识别、结合和开始转录所必需的一段DNA序列。 起始过程中，σ因子起关键作用。 图：转录过程 三、启动子和转录因子 启动子（promoter）：RNA聚合酶识别、结合并开始转录所必需的一段DNA序列。 转录因子：RNA聚合酶在进行转录时，常需要一些辅助因子（蛋白质）参与作用，此类蛋白质称为转录因子。 足迹法和DNA测序法确定启动子的序列结构。 （图） ? 图：足迹法和DNA测序法确定启动子的序列结构 图：启动子共有序列的功能 2. 真核启动子 真核基因的转录十分复杂，对启动子的分析要比原核基因的困难得多。 （1）RNApolⅡ的启动子 RNApolⅡ转录mRNA A. TATA框（Hogness框） 中心在-25至-30，长度7bp左右。 碱基频率：T82 A97 A85 A63 （T37 ）A83 A50（T37 ） 此序列功能：DNA双链解开，并决定转录的起点位置，失去TATA框，转录将可能在许多位点上开始。 四、终止子和终止因子 提供转录终止信号的一段DNA序列，称为终止子。 协助RNA聚合酶识别终止子的辅助因子称为终止因子（蛋白质）。 有些终止子的作用可被特异的因子所阻止，使酶越过终止子继续转录，此为通续。这类引起抗终止作用的蛋白质称为抗终止因子。 终止子位于已转录的序列中，DNA的终止子可被RNA聚合酶或其辅助因子识别。 图：终止子 图：Transcription termination 五、转录过程的调节控制 图：Lactose operon 图：Inducer inactivates the lac repressor 第二节 RNA转录后的加工 RNA聚合酶合成的原初转录产物，经过剪切、修饰、拼接等过程，转变成成熟的RNA分子，此过程称RNA转录后的加工。 （1）原核、真核的tRNA、rRNA（稳定RNA） 在细胞内的tRNA、rRNA相对稳定，半衰期一般为几个小时。所有的tRNA、rRNA都不是原初转录产物。 a. 原初转录产物的5’是三磷酸（pppG、pppA）， 而成熟的tRNA、rRNA ，5’是单磷酸。 b. 成熟 tRNA、rRNA分子都比原初转录物小。 c. 所有的tRNA分子，都有原初转录物所没有的稀有碱基（A、G、C、U以外的碱基）。 图：Eukaryote mRNA-1 图：Eukaryote mRNA-2 一、原核生物RNA的加工 在原核生物中，rRNA基因与某些tRNA基因组成混合操纵子，可提高效率、节省空间（增加有效信息）。其它的tRNA基因也成簇存在，并与编码蛋白质的基因组成操纵子，它们在形式多顺反子转录物后，断裂成为rRNA和tRNA的前体，然后进一步加工成熟。 1. 原核rRNA前体的加工（E.coli） E.coli共有三种rRNA 5S rRNA 120b 16S rRNA 1541b 23S rRNA 2904b 原初转录物含6300个核苷酸，约30S。 rRNA基因与tRNA基因混排在一个操纵子中，E.coli共