小鼠Ⅲ型前胶原肽 (PⅢNP)-ELISA试剂盒说明书.pdfVIP

小鼠Ⅲ型前胶原肽 (PⅢNP)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 产品编号：E-EL-M0835 （本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!） 声明：尊敬的客户，感谢您选用本公司的产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用 专业ELISA kit 生产技术制造。适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上 清液中天然和重组PⅢNP 浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分！如有疑问，请及 时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。 试剂盒组成： 名称-中文 名称-英文 规格 保存条件 ELISA 酶标板 Micro ELISA Plate 8×12 / 8×6* 4℃ 冻干标准品 Reference Standard 2/ 1 支* 4℃ 标准品样品稀释液 Reference Standard Sample Diluent 1 瓶 20mL/12mL* 4℃ 浓缩生物素化抗体 Concentrated Biotinylated Detection Ab 1 支 120μL/70μL* 4℃ 生物素化抗体稀释液 Diluent for Biotinylated Detection Ab 1 瓶 10mL/6mL* 4℃ 浓缩HRP 酶结合物 Concentrated HRP Conjugate 1 支 120μL/70μL* 4℃(避光) 酶结合物稀释液 Diluent for HRP Conjugate 1 瓶 10mL/6mL* 4℃ 浓缩洗涤液 （25×） Concentrated Wash Buffer （25×） 1 瓶 30mL/16mL* 4℃ 底物溶液 （TMB ） Substrate Reagent 1 瓶 10mL/6mL* 4℃(避光) 反应终止液 Stop Solution 1 瓶 10mL/6mL* 4℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5/3 张* 产品说明书 Product Description 1 份 *: [96T/48T] （打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整） 检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠PⅢNP抗体包被于酶标板上，实验时标本或标准品 中的PⅢNP会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠PⅢNP抗体和辣 根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠PⅢNP抗体与结合在包被抗体上的小鼠PⅢNP结合、生物素 与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB) ，TMB在辣根 过氧化物酶的催化下现蓝色，加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值，PⅢNP浓度与 OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线求出标本中PⅢNP 的浓度。 标本收集: 1. 血清：全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集 血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。 2. 血浆：抗凝剂推荐使用EDTA.Na2，标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可 检测。避免使用溶血，高血脂标本。 3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞 会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS （一般按1:9的重量 体积比，比如1g的组织样本对应9mL 的PBS ，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记 录。推荐在PBS 中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂 解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×