人肺癌高转移细胞系的转移相关基因观察.pdf

Animaland Medicine Apr．2011,31(2) 实验动物与比较医学LaboratoryComparative 79 1．02．001 doi：10．3969／j．issn．1674—5817．201 ·论著· 人肺癌高转移细胞系的转移相关基因观察 姚明l2，李静2。荚德水：，张方琳1，闫明霞z，刘蕾2，张书霞· (1．南京农业大学动物医学院，南京210095；2．上海市肿瘤研究所实验病理研究室，上海200032) 【摘要】目的 观察人肺癌高转移细胞系SPC—A-1sci的转移相关基因表达，同时验证该细胞系的 体内高转移特性。方法通过Western MMP一9，EGFR在高、低转移细胞系间的差异表达；采用尾静脉注射方法观察高、低转移细胞系 的转移特性。结果 移细胞中的表达均显著上调。体内实验表明，8周时高转移细胞系的肺转移率为100％(12／12)，而 低转移细胞系的肺转移率仅为16．67％(2／12)。结论人肺癌高转移细胞系SPC—A一1sci在转移相 关基因表达和动物体内均表现出典型的高转移特性，为该细胞系的推广应用提供了参考依据 【关键词】肺癌；细胞株；肿瘤转移；转移相关基因 【中图分类号】R734．2Q95—33【文献标识码】A 【文章编号】1674—5817(2011)02—0079．04 肿瘤的发生和发展是一个长期性、多阶段、 因及相关基冈重点实验室惠赠，SPC—A一1sci为本实 多因素参与的复杂过程，其转移受许多基因及其产 物的调控。甘前报道的与肿瘤转移调控相关的基因 筛选建立的高转移细胞系。培养条件为DMEM培 较多，它们相互协同或拮抗共同影响肿瘤细胞的生 养基，内含10％胎牛血清和青霉素(100 U／m1)及链 物学特性，促进肿瘤转移的发生m引。本研究在已 霉素(100 mg／m1)，细胞培养环境为37℃，5％C02。 建立的人肺癌皮下移植瘤高转移模型及相应的高转 1．1．2实验动物SPF级雌性BABL／c裸小鼠，6～ 移细胞系SPC—A．1sci基础上【4】，通过体内、外实 7周龄，体重18—22 g，由上海市肿瘤研究所提供 验观察转移促进基因CD44(粘附冈子)，OPN(骨桥 蛋白)，MMP一9(基质金属蛋白酶)，EGFR(表皮生颗粒饲料及其他与动物接触的物品均经高压灭菌处 长因子受体)在高转移细胞中的表达，同时验证该 理。实验和饲养条件严格按照SPF动物的规范要求 细胞系的体内高转移特性，为进一步的肺癌的防治 【SYXK(沪)2007—0001】。 和转移机理研究提供一个理想的模型。 1材料与方法 牛血清购自PAAlaboratories GmbH公司，培养皿 及培养瓶均购自Coming公司，其余均为进口分装试 1．1材料 1．1．1细胞株人肺癌细胞株SPC—A—l由国家癌基 Cruz 公司。激光共聚焦显微镜采用OLYMPUS公司产 【收稿日期】2010．12—20 品，型号为FVl000。 【基金项目】上海市科委创新行动计划(09140902000，