人胰岛素和胰岛素原单克隆抗体制备及分析.pdf

第!! 卷，第 期 深圳大学学报理工版 #$% !! ，’$ !(() 年*( 月 +,-.’/0 ,1 234’534’ -’6#4.2678 2964’94 /’: 4’;6’44.6’; ,= !(() !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 文章编号：*(((!?*@（!(() ）( (A( () 人胰岛素和胰岛素原单克隆抗体制备及分析 刘士德，张建华，余少文，张维德，邢N 苗 （深圳大学生命科学学院，深圳市微生物基因工程重点实验室，深圳)*@(?( ） 摘N 要：应用杂交瘤技术获得针对胰岛素和胰岛素原的各 株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞C 其 中 株分泌胰岛素单克隆抗体的细胞 （’6*、’6O 、’6*A 、’6*) ）所分泌的抗体亚型均为6P;*；分泌 胰岛素原单克隆抗体的细胞株所分泌的抗体亚型分别为6P/ （’Q6* ）、6P;* （’Q6A 、’Q6) ）和6P;!E （’Q6B ）；所有抗体的轻链均为 型C 所制备的胰岛素原单克隆抗体均不与胰岛素和9 肽交叉反应，但所 ! 有胰岛素单克隆抗体均与胰岛素原交叉反应C 关键词：胰岛素；胰岛素原；单克隆抗体 中图分类号：. AB!N N N N 文献标识码：/ 叉反应的胰岛素原单克隆抗体，并分析了胰岛素单 引N 言 克隆抗体和胰岛素原单克隆抗体的特异性C 胰岛素的分离及临床应用始于!( 世纪!( 年 *N 材料与方法 代，是临床上控制糖尿病、预防由糖尿病引起的慢 ［*］ 性血管疾病综合症最有效的药物 C 但是，长期使 ! !# 材料 用异源或不纯的胰岛素会使患者体内产生抗胰岛素 # 纯化的基因重组人胰岛素原及胰岛素：由 的抗体，而抗体又会与胰岛素结合成胰岛素贮库， 深圳科兴生物制品有限公司惠赠C 胰岛素、胰岛素 引起延迟的低血糖危险［! ］ C 细胞分泌的胰岛素原 原和9 肽标准品购自2FPDE 公司C 有 ［A ］ B(R S BO R 转化为胰岛素 C 糖尿病临床检测一 $ @ S *( 周龄的雌性TE%UV 小鼠，中科院上海 ［ ］ 直以血糖和尿糖作为指标 ，忽略了胰岛素贮库和 细胞所提供C ［) ］ 66 型糖尿病人具有部分胰岛素分泌功能等问题 C % ’2’6V */; * 骨髓瘤细胞 （简称’2*，来 胰岛素单克隆抗体和胰岛素原单克隆抗体的研制成 自QAW?A/P* ），中科院上海细胞所提供C 功为临床监测糖尿病人的胰岛素和胰岛素原水平提 其他试剂：弗氏完全佐剂 （19/ ）、弗氏不 供了重要的手段C 另外，临床上的胰岛素药物过敏 完全佐剂 （16/ ）、3/7 、Q.X6*?( 均购自;6T9, ［? ］ 一般是由胰岛素不纯引起的 ，胰岛素单克隆抗体 T.0 ；Q4;((( （XLYZ ）；胎牛血清 （3[%$ML ）； 和胰岛素原单克隆抗体的研制成功也为胰岛素生产