腹主动脉瘤自身免疫损伤中CD4-%27%2b-CD25-%27%2b-调节性T淋巴细胞功能缺陷的研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 细胞功能缺陷的研究 目的 aortic 腹主动脉瘤(abdominal aneurysm，AAA)是以腹主动脉中层弹力纤维降解 损伤导致的扩张为特点。西方流行病学调查显示，近年来AAA的发病率不断迅速 上升，男性约为1．3．8．9％，女性为1．O．2．2％。AAA破裂将直接危急患者生命。在美 管重塑再造过程，而不是单纯的动脉硬化退行性病变。最近的有关人AAA组织及 动物模型研究显示免疫反应在动脉瘤疾病的发病机制中超着重要的作用。其中， 自身免疫在AAA的发生和发展中所起的作用正逐渐被认识。我们最近的研究显 示，AAA患者体内的T淋巴细胞存在着Fas功能缺陷，对由Fas诱导的细胞调亡 不敏感，表现为不断增殖的特性，研究提示过多的致病性的自身反应性T淋巴细胞 在AAA患者外周血中长期存活并增殖，识别腹主动脉组织的自身抗原，引发了一 系列与腹主动脉扩张直接相关的自身免疫反应、生物化学反应及生物机械力学反 应。在机体免疫应答中，T淋巴细胞能够识别入侵人体的外源性物质(如病原微 生物等)，引发一系列免疫反应，使人体免受外源性物质的侵犯。最近的研究发现 T 这些T细胞又受到第二组细胞一调节性T细胞(regulatorycell，Treg)的调控。 Treg细胞能够保证T淋巴细胞不会攻击人体自身证常细胞及组织，从而避免自身 免疫损伤。因此Treg细胞在维持外周免疫自身耐受及稳定中起到了关键作用。影 响Treg细胞发育及活性发挥的因素很多，新近发现的叉头／翼状螺旋转录因子 box (forkhead 胞表型及活性，在机体自身免疫的稳定中起到了决定性作用，成为研究Treg细胞 少和／或功能的障碍都会引起自身免疫疾病，同时，Foxp3突变、缺失及表达下降 也可以引起自身免疫性疾病。因此，本研究的目的是通过分析AAA患者和健康人 群外周血中Treg细胞数量、FOXP3 巴细胞的抑制功能来证实导致AAA自身免疫损伤源于机体免疫系统上游的调节 障碍，从而揭示AAA发生发展的分子生物学基础。 实验方法 调节性T淋巴细胞的数量进行分析及与正常人群的对照研究。2、采用流式细胞仪 time 正常人群的对照研究。采用Western蛋白质印迹及RealPCR技术进行FOXP3 同时探讨它们的抑制功能与FOXP3表达相关性。 实验结果 本试验应用流式细胞仪(FACScalibur,FACSAria,BD 5．69 CD4+CD25+T细胞纯度进行鉴定，纯度大于95％。而AAA患者的 4-0．57％)比值明 显低于健康对照组(均值士标准差3．69a：O．82％；P0．01)，差异具有统计学意义。 time PCR技术进行FOXP3蛋白、 本试验采用Western蛋白质印迹及Real 2 法测定A值并进行抑制率的计算，发现无论是AAA患者还是健康人群，当 细胞对CD4+CD25’T淋巴细胞的抑制能力明显低于新鲜分离的健康对照者的 降是否与其内在的功能降低或效应细胞对Treg细胞的抑制能力的对抗增加有关， 细胞进行了交叉混合培养，发现从AAA患者新鲜分离的Treg细胞除了对其自身的 效应细胞的增殖抑制力下降，对新鲜分离的健康人群的效应细胞的增殖抑制力也 细胞的增殖。通过线性回归分析，AAA患者和健康人群外周血中的单个核和细胞 存在正向关。 结论 本实验研究表明，在本组AAA患者与健康人群相比，虽然不存在着