子宫内膜癌细胞和组织中胰岛素受体亚型的表达及作用的初步探讨.pdfVIP

生垡塑要垫苤查垫!!芏!!旦箜!!鲞箜!!塑￡!也』Q!坐!生理!!型：塑!!!些!里垫!!：!!!．!!：堕!：!! 839· ．基础研究． 子宫内膜癌细胞和组织中胰岛素受体 亚型的表达及作用的初步探讨 张果 李小平 王建六魏丽惠 【摘要】 目的研究胰岛素受体(IR)亚型(包括IR—A和IR—B)在子宫内膜癌细胞及组织中的 表达情况，并初步探讨IR—A在子宫内膜癌细胞增殖中的作用。方法选取4种不同子宫内膜癌细胞 系HEC—l—A、Ishikawa、RL95-2、KLE细胞，以乳腺癌细胞系MCF-7细胞和肝癌细胞系Hep—G2细胞为 阳性对照；收集2007年11月一2009年7月间北京大学人民医院收治的42例子宫内膜癌患者的癌组 织标本，以同期收治的15例因卵巢肿瘤仃子宫切除术患者的正常子宫内膜组织标本作为对照。(1) 采用逆转录(RT)一PCR技术检测4种不同子宫内膜癌细胞及组织中IR亚型的表达形式，应用实时定 量PCR技术检测其IR及IR—A mRNA的表达水平，采用Spearman等级相关分析方法对影响子宫内膜 癌组织中IR及lR-A mRNA表达的临床病理因素进行分析。(2)构建稳定过度表达IR．A基因的 RL95—2细胞系RL95—2(1R—A)细胞，采用非放射性细胞增殖检测法——MTs法检测4种不同子宫内 膜癌细胞和RL95—2(IR—A)细胞培养l～7d的增殖情况。结果(1)RT—PCR技术检测显示，在子宫 内膜癌HEC一1一A、[shikawa、RL95-2、KLE细胞及组织中，IR均以IR—A和IR—B两种亚型共同表达。实 时定量PCR技术检测显示，在子宫内膜癌细胞中，IRmRNA的表达水平以RL95—2细胞最高，其次为 Ishikawa、KLE和HEC．1一A细胞，其IRmRNA的表达水平分别为(26．54±I．82)×10～、(15．44± 3．29)X10一、(10。14±0。10)×10“和(2．63±0．23)X10一，4者比较，差异有统计学意义(P 0．01)；IR—AmRNA的表达水平以Ishikawa细胞最高，其次为KLE、RL95—2和HEC．1．A细胞，其IR-A 10“和 mRNA的表达水平分别为(12．07±3．31)×10一、：4．68±0．63)X10一、(3．03±0．22)x (1．46±0，03)x10，4者比较，差异有统计学意义(P0．01)。在子宫内膜癌组织中，IR及IR．A mRNA的表达水平分别为0．017±0．013、0．0114-0．010，分别与对照组(分别为0．015-4-0．014、 0．010±0．012)比较，差异均无统计学意义(P=0．662，P=0．780)。子宫内膜癌组织中IR及IR—A mRNA的表达水平与手术病理分期、病理分级、肌层浸润、淋巴管癌栓、淋巴结转移及ER、PR、PTEN 基因的表达均无明显相关性(P均0．05)；IR—AmRNA的表达水平与有无2型糖尿病明显相关(P= 0．031)，但IRmRNA的表达水平与有元2型糖尿病无明显相关性(P=0．438)。(2)本研究成功构建 过度表达IR—A基因的RL95—2细胞系RL95．2(IR—A)细胞。MTS法检测显示，分别培养1—7d后， 4种不同子宫内膜癌细胞中以lshikawa细胞的增殖速度最快，其次依次为HEC．1一A、KLE和RL95-2细 胞，4种细胞各时间点分别比较，差异均有统计学意义(P0，01)；稳定转染后的RL95-2(IR．A)细胞 的增殖速度明显快于未转染的RL95～2细胞，差异有统计学意义(P0．01)。结论子宫内膜癌细胞 及组织中IR均以IR—A和IR—B两静亚型共同表达，过度表达IR—A基因可促进子宫内膜癌缨胞的 增殖。 【关键词】 子宫内膜肿瘤；受体，胰岛素； 高胰岛素血症 ofthe andfunctionsofinsulin isoformsinendometrial Preliminaryinvestigationexpression receptor carcinomaZHANG Guo，LI Jian—liu，WEI of Xiao-pin