PEDV膜蛋白基因RT_PCR最适反应条件的确立(论文资料).pdfVIP

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2015-09-26 发布于重庆
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PEDV膜蛋白基因RT_PCR最适反应条件的确立(论文资料).pdf

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8 2001 1 PEDV RT - PCR ( 湖北省农业科学院生物技术研究所武汉 430064) ( PEDV ) RNA , ( PEDV) RT - PCR , RT - PCR ( PEDV) RT - P CR ( PEDV) , , : ¹, 500Ll Trizol 115ml Eppod n , 3 ( PEDV) , DNA º [ 1] 5min, » ( PEDV) / ( 49B1, V/ V) ¼, , , , ½75% ¾ , 75% , TEbuff r , - 80 e RNA[2~ 4] , , 112 引物设计 ( transmissibl gastro nt ritis Durat , 3 T GE) PEDV PEDV ( M) , cDNA RT - RT ) PCR , 3 : PCR , P1: ( 20m r) 5. - GGACACATT CT- T GGT GGT CT- 3. ; ( M) RT - PCR P2: ( 24m r) 5. - GT TTAGACTAA- , PEDV cDNA AT GAAGCACTTT C- 3. ; , PEDV P3: ( 25m r) 5. - GCCATAAAGTT- PEDV T CT T GTTTAGACTAA- 3. ; P1 P2 PCR , P3 1 cDNA 111 流行性腹泻病毒 ( PEDV ) 核酸的提 113 流行性腹泻病毒蛋白 ( M) 基因RT ) 取与纯 PCR 扩增 , cDNA : ¹ 015Lg , , RNA, 12Ll DEPC ; º 1Ll , , - 20 e 10LMoligo ( dT) ; »65 e 10min, ; ¼5 @ First strand : , , 1969 ,