一种用PCR快速检测绒毛性别的方法(论文资料).pdfVIP

维普资讯 中国优生与遗传杂志 1《3) 一 种用PCR快速检测绒毛性别的方法 浙江省绍兴第：医院连传室 (3i~ooo)俞信忠 周 雍 李 贤 内窑提要 本 文采 巩怯速提蓦上绒毛细胞DⅣ ，用 采 色体特 畀性 ；l枷， 五过PC 扩增】，染色体上特异性片拉．砖胎 儿连行性圳鉴定．在对』o洲流产绒毛所做 吉果． 例 为男性 ，3铡均女】f生，井与 染色体G、’C带时 照，完奎一致 ． 关■调 挂踟鉴定 PCI?J~．术 探计 性连锁遗传病 已发现仃，玎种．对疑 噬诗删定上清波中绒毛DNA的 ；t鞋．平 有性连锁遗俺病；精儿进行性踟诊断，在 均 f苴为414gg／mI，0D260／()D280= 产前诊断 中占有重要位置．本文采用快速 i．4l(平均值)．嫂取上清澈， FDDS 提取 毛DNA，用Y染色体持砖性 0f物， 高灵敏度人 的性别鉴定试 剂盒来扩增Y染 通过PCR扩增Y染色体上特异片段．进行 色体上特异的DNA~-断． 胎儿性别诊断 ． Y染色体上特异的DNA片断的扩增， 材料与方法 在40P-1反应混台液中进 行 ．Jq台j 5× PCR Buffer813．1，1O× Primors4 1， 一 、 材料 褥 台dNTP泣 (各 2mM) 4u1，绒 毛 1、样品 绒毛DNA由 _洫产绒毛制 DNA上清液 2 1，FDDNA po!ymela$e 备N试产绒毛取 自上海第卉人民医院，盲 11(含2。) ，高纯水21l，混匀，离心， 法取材． ． 加石腊~qS0P-1．d-：PCR反 道 仪 上，按照 2、试剂 TLS (中国医学科学院基 反应脚朝93~C45秒 【变性)、55℃45秒 (退 础医学研究所友谊医学科 技开 发 公司； 火j、71)~C90秒 (延伸) ，循环3O个膈期 品)FDDS高灵敏度人的性别鉴定试箭盒 终止．所扩增的片断长446bp． (复旦大学科学技术开发总公司产 )． 扩增DNA灼检测：取PCR扩 增产物 3、仪器 紫外分光光 度 计 是岛津 I 1，用 l2％聚丙烯凝胶 电泳 ．b瞪l0v／ UV 31OO、PCR反 应 议 是Appligene cm，时 间2小时，溴 乙锭染色2O分钟，在 Crocodile、紫外检测摄影仪是LKB2006、 紫外检测摄影仪上观察，作荧光摄象 ． 显微镜是OlympusBHS一312． ‘ 同时，取流产绒毛削成染色体标墨， 、 二 方法 取流产 绒 毛 5～ 10mg， 经G和C显带 【“质，进行核型于}析 置 I．5州I离心管内，拥 生理 盐 水25mi， ， 菇 果 用磨豫请 棒研 碎躐 毫组织，再