“瘦肉精”的ELISA检测方法与GCMS方法比对分析(论文资料).pdfVIP

··京津冀畜牧兽医科技创新交流会暨新思想、新观点、新方法论坛，，论文集 彤， 起始模板最进行定量，无颁在扩增后进行操作，从而避免了污染的可能；且反应所需时间短，可进行大 量样本的检测阻“。 参考文献(略) “瘦肉精”的ELISA检测方法与GC—MS方法比对分析 刘纪艳蒋奎 (天津市动物卫生监督所) 摘要：目的：为杜定“瘦肉精”的筛选试验EIJSA检测方甚的准确性及与确证试验∞一MS方法 的符台性。方法：采用E￡^钳检剥方法筛选出“瘦内精”阳性的样品，再用GCM5方法进行分斩比 对。结果：在ELISA初碲试验阳性的如份样品，蹦∞一MS方法植测出29份阳性。结论：ELISA检测 方法作为瘦内精橙测的筛选方法，夏敏、准确．与C-G—MS方法符合性也很高。 关键词：痘由精；准确性；分析比对；EUSA；∞一MS orderIo Ihe…㈣ofan8 whichcon- AbstradI：Objeclive：Incertify ofELIs^Methods：SampleB tained bv…ofELISA…analdm…by ofGC—MS There eelenbuleml肌alysed Re…h is30 contained s圳meswhichcelenhutemlanalysedby…sofELISA．bul29㈣INb—ofGC— MS Conclusion ELISAissensitireand…Hte rl一of Keywords：Clenbutewl；Accuracy；Contrast；ELISA：CC—MS 盐酸克伦特罗能抑制细胞的脂肪合成，促进动物牛＆，改善动物体内脂肪分配，增加瘦肉率．斟此 俗称“瘦肉精”，叉名双氯醇胺、克喘素，属于IS兴奋剂，用于治疗人和动物的阻塞性支气管哮喘“}。 九十年代曾错误地将其作为科研成果而在饲料业中推广，随后一系列的食用含“瘦肉精”食物的中毒 事件发牛，世界上很多国家开始禁lL其作为饲料添加刺使用。人在食J；{5古“瘦肉精”食物30分钟左 右即可出现心悸、头晕。恶心、心慌等症，甚至会危害人的生命。我国在1997年也开始禁止畜牧行业 生产、销售和使用，但却屡禁不止，瘦肉精中毒事件仍时有发生。因此．为保证肉食品安全．保障人民 身体健康．增强我国动物性食品的国际竞争力，建市和完善盐酸克伦特罗的检测技术具有重大意义。 目前盐酸克伦特罗的常用检测方法有气厦联用法(Gc—MS)’高教棱相色谱法(H眦)和酶联 国内外已有很多公司生产克伦特罗快速检测试剂盒。 1 ELISA法检测“瘦肉精” 1 1方法原理 采用间接竞争ELISA方法，在酶标|匾微}L条上预包被偶联抗原，样本巾残留的克仑特罗和微7L 条上预包被偶联抗原竞争抗克仑特罗抗体．加A酶标二抗后，用TMB底物显色．样本吸光度值与其所 吉残留物克仓特罗的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即呵得出样品中克仓 特罗的含量。 1 2样品前处理(按试荆盒说明书进行) 1 2 1尿液将尿液于3000 夕7纩 ·-京津冀畜牧兽医科技创新交流会暨新思想、新观点、新方法论坛，，论文集 清亮尿样直接测定。 50mmol／ 1．2．2组织称取5．0±0．059粉碎的组织样本至50ml聚苯乙烯离心管中，加入25m1 500mM磷酸二氢 苯乙烯离心管中，加3001xLlmol／L氢氧化钠，用振荡器振荡15min；加入4mLpH3．0 部上清液，使其升至室温(20—25。C)；然后用RIDAC18柱纯化。取201上L用于分析。 1．3测定步骤(按试剂盒说明书进行) ． 1．3．1 实验准备将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温(20—25。C)平衡30min以上。取 出需要数量的微孑L板，将不用的微孔放入自封袋，保存于2—8。C。洗涤工作液在