体外细胞培养应用于中药复方研究的进展(论文资料).pdfVIP

维普资讯 锈外}{ 、rf 星垫鱼 继塑塑 ；f／『谍体外外细细胞胞培培养养应应用用于于中中药药复复方方研研究究的的进进展展 黄海茵 。郭映华 于 一 纵观现代医学研究史，体 内(invivo)实验和体外 细胞表面标志物的表达等指标。作用时间各家报道不 “。 (invitro)实验是不可分割的两个方面。从各 自的地位 一 ， 有与中药短时间作用(30min或 2h)，一般选择 来看，由于体外实验的结果最终要通过体 内实验来证 作用 1～3天。中药的有效作用浓度依提取、制备方法 实其价值，体 内实验更为重要。然而，体外实验 以其需 的不同而变化较大。含药血清作体外细胞培养时，一 时短、实验条件和因素易于控制，便于进行相对复杂的 般认为其浓度不应超过 20％ 。 实验设计．可以避免体 内实验 的伦理学问题等优点，在 3 中药在体外细胞培养中的作用 现代医学的发展中发挥了极为重要的作甩，而现代医 3．1 对免疫细胞的作用 日本学者将小柴胡汤 学的许多重大突破源于体外实验的启迪。在中西医结 制剂 (100g／m1)加入 LAK 细胞培 养系统 中，发现 合临床实践中，中药复方仍然是主要的用药方式。但 LAK活性明显升高 。以黄芪、紫草、土茯苓、灵芝等 在体外实验 中，将中药复方或单方(单方本身含有多种 组成的复方在体外与重组人白细胞介素 2受体(rlL一 成分，因而也可看作为 1个小复方)的提取物直接加入 2)共同诱导LAK细胞，可将 rlL一2浓度降至常规浓度 体外细胞培养系统中的方法，易受多种因素干扰，其结 的10％，与对照组比较有显著性差异，且对 胃癌细胞 果的可靠性受到怀疑。这使得用体外细胞培养来研究 株 SCG7901的杀伤率与常规浓度 rIL一2诱导的LAK 中药复方(或单方)的工作进展缓慢，一定程度上阻遏 细胞无显著性差异”。冬虫夏草醇提液在 0．1、lmg／ 了中西医结合的发展。尽管存在许多困难，人们在这 ml浓度下体外处理人外周血淋 巴细胞，可使其NK细 一 领域中仍做了大量工作。近年来兴起的血清药理学 胞活性随时间依赖性增强 。0．img／ml黄芪注射液 方法，有希望克服中药粗制剂直接体外用药的不利因 预先处理效应细胞 20h，可明显提高 NK细胞活性 。 素，已成为当今中药复方研究的一个重要动 向。本文 当归水提液 500ttg／ml浓度在体外可促进淋巴细胞产 就国内外对这一领域的研究进展情况作一综合述评。 生 IL一2“。 1 细胞培养中药制剂的制备 对免疫细胞抑制作用的报告有：雷公藤体外用药 制备用于细胞培养的中药制剂有较高的要求。用 可降低外周血淋 巴细胞对 IL一2的反应性，抑制 IL一2 蒸馏水煎煮后，有的直接采用水煎液 ’，更多的用水 的产生，但对 IL一2受体数和NK细胞活性均无显著性 提醇沉提取液 ，过滤、浓缩、调节 pH，还需用微孔滤 影响 。给小鼠胃饲人参水提液后可提高其体 内NK 膜或高温除菌，最后制成供体外细胞培养用的中药原 细胞活性，但体外用药在高浓度 (非毒性浓度)时，可抑 液。血清药理学方法的药物制备则是先给供体按临床 制淋巴细胞增殖 。 用药量(志愿者)，或临床等效剂量(动物)给药，一定时 3．2 对肿瘤细胞 的作用 日本学者对古典名方 间后采血分离血清，含药血清被分离后，应置56℃水 小柴胡汤在体外对人肝癌细胞株(KIM一1)和胆管细胞 浴中灭活补体；若需长期保存，需冷藏于一20℃以下备